使用NCBI Primer-BLAST 设计引物

1. 进入NCBI BLAST

NCBI_BLAST_tool.png

2. 进入Primer-BLAST

Primer-BLAST.png

3. 输入模板序列，根据要求：是否跨外显子设计引物，产物长度，退火温度，GC含量等设置参数。

输入目的片段以及产物大小.png

输入参考基因组_转录组_错配.png

设定GC含量.png

新窗口显示结果.png

4. 耐心等待引物设计结果

耐心等待结果.png

5. 通常选择前3对进行验证

引物设计结果.png
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