背景:
1.可用于PVDF膜,硝酸纤维素膜和和醋酸纤维素膜上的蛋白的检测。
2.原理:丽春红带负电荷,可以与带正电荷的氨基酸残基结合,同时丽春红也可以与蛋白的非极性区相结合,从而形成红色的条带。
3.丽春红对蛋白的染色是可逆的,染色后可以用蒸馏水,PBS或其它适当溶液洗去。
4.通过丽春红染色可验证转膜效率,及每孔上样蛋白总量是否均等,可以帮助后续实验进行内参调整或问题分析。
特别说明:丽春红染色液不适用于尼龙膜上的蛋白检测。
实验步骤:
1.将转印膜浸没在丽春红染色液中,用摇床孵育转印膜 1-30 分钟。
2.取出转印膜,用去离子水冲洗膜直到背景干净(通常不超过 5 分钟),条带清晰,记录结果。染液可以继续用去离子水洗涤完全去除丽春红,进行后续的WB检测。