大部分的科研工作者通常遵循如下流程：
1 U限制性内切酶可以完全酶切1μg经过纯化的DNA，总体积为20 μl于1×CutOneTM Buffer环境下进行反应。为防止总酶量超过总体积的10%，在双酶切时可以适当扩大反应体系。千万不要孵育超过星活性出现的时间（星活性出现时间请查阅各酶说明书）。
另外一个容易被忽略的问题对于酶切的影响也非常大，在反应体系配制完成后完全的混匀才能反应完全，推荐用枪头轻轻吹打3到5次或用手指轻弹管壁，之后用离心机瞬离即可。不要涡旋反应体系，剧烈震荡对酶的活性有极大的影响。
限制性内切酶 愚公生物&百时美
