基因敲除细胞构建服务|VIRUS-Free™系统大片段纯合敲除方案

基因敲除是一种基因工程技术,用于使生物体DNA中的特定基因失活或“关闭”。通过永久移除该基因或改变其序列使其丧失功能,科学家可以观察基因缺失后的现象,从而了解其生物学功能。

一、海星HySigen 细胞基因敲除原理

CRISPR 介导的基因敲除:该技术利用合成的向导 RNA (gRNA) 引导 Cas9 酶到达目标基因 DNA 上的特定位置。一旦到达目标位点,Cas9 会在 DNA 上诱导产生精确的双链断裂 (DSB)。随后,细胞内的自然修复机制(如非同源末端连接 [NHEJ] 或同源定向修复 [HDR])会被激活。NHEJ 修复过程常导致小片段的插入或缺失,从而破坏基因的阅读框,使基因丧失功能。基因敲除的成功与否通过分子生物学技术进行确认,以验证突变的存在及目标基因的功能性失活。我们 CRISPR/Cas9 系统的特色在于利用双 gRNA 产生双重双链断裂 (dual DSBs),从而实现目标序列 100% 的敲除效率。

图1. 基因敲除服务原理示意图


海星HySigen VIRUS-Free™ 技术

海星生物(HySigen) 创新的“VIRUS-Free™ 系统”——是一种旨在显著提高细胞系基因敲除效率的突破性实验方案。

技术优势

利用先进的电穿孔设备,实现更高的电穿孔效率并提升细胞存活率。

采用专利ClonePlus™ 技术,将阳性单克隆的生成率提高 10-15 倍。

通过PCR 分析快速鉴定大片段缺失。

支持非移码(non-frame-shift)基因敲除,确保细胞系中的基因互补功能,无需担心突变修饰带来的影响。

基因敲除细胞株构建服务流程

除常规细胞系外,海星生物(HySigen) 还提供干细胞基因敲除服务、大片段和非编码RNA敲除,交付纯合子单克隆,DNA层面100%敲除。

海星HySigen 细胞基因敲除技术

海星HySigen 基因敲除服务高分文献分享

文章使用了 海星生物HySigen 的 “CRISPR/Cas9 基因敲除服务”

IF:52.7 基因敲除HepG2中的ALB

Ma B, Ju A, Zhang S, et al. Albumosomes formed by cytoplasmic pre-folding albumin maintain mitochondrial homeostasis and inhibit nonalcoholic fatty liver disease[J]. Signal Transduction and Targeted Therapy, 2023, 8(1): 229.

IF:52.7 基因敲除永生化小鼠骨髓源性巨噬细胞

Xu Y, Zheng Y, Liu Y, Wei C, Ren J, Zuo W, Gu R, Liu H, Deng X, Liu Y, Shang X, Ge W, Li Z, Huang Y, He D, Shen X, Wang Z, Lyu C, Wang Z, Mu Y, Zhang Z, Wu H, Li H, Cao B. Ninjurin-1 mediates cell lysis and detrimental inflammation of PANoptosis during influenza A virus infection. Signal Transduct Target Ther. 2025 Sep 23;10(1):307. doi: 10.1038/s41392-025-02391-9.

技术服务:CRISPR/Cas9细胞基因编辑、CRISPR文库筛选/文库病毒/载体构建、分子诊断参考品/突变基因参考品/融合基因参考品、细胞稳转 / 细胞干扰

细胞试剂:HyCyte®干细胞/原代细胞/细胞株、三系诱导培养试剂、细胞专用培养基、基因编辑试剂盒、病毒现货、预筛选胎牛血清

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