DNA和siRNA转染是细胞生物学最常见的实验之一。对于此类核酸转染实验，转染试剂的选择尤为重要。从严格的专业角度看，由于DNA和siRNA在分子大小、载电荷以及分子构型方面存在较大差异，DNA转染最好选择专门的DNA转染试剂，siRNA转染最好选择专门的siRNA转染试剂。但有些研究者需要将两者同时或先后转入细胞，也有些研究者经费不够宽裕，出于实验需求，这些研究者都希望配置一款既能转染DNA又能转染siRNA的转染试剂。
目前，市场上既能高效转染siRNA又能高效转染DNA的转染试剂非常之少。其中，Lipo3000(Lipofectamine3000)是国际公认的既可转染siRNA又可转染DNA的权威品牌，Rfect Prime是海归科学家研发的较为知名的国产品牌，拥有核心知识产权，采用可降解生物纳米材料配制而成。Rfect Prime与Lipo3000相比，各自的性能特点如何，本文拟从转染性能、毒性和操作简便性三个方面简述如下。
一、转染性能
转染性能是研究者在选择转染试剂时最为关注的指标。一款转染试剂无论对于普通的细胞株还是难转染的细胞，都具有不错的转染效率才能成为研究者的“实验好搭档”。
1）在普通细胞株中的转染
Hela细胞是实验室常用的宫颈癌细胞株，由于具有无限增殖的特性，常被用于肿瘤研究、细胞转染等实验中。在验证转染试剂性能时，也常将这种细胞株用于质量控制。我们使用RFect Prime和Lipo3000分别转染Cy3-siRNA到Hela细胞中，并于24h在荧光显微镜下观察转染效率，结果显示两款转染试剂对siRNA的转染阳性率均达到了90%以上（图A和B）。
在进行DNA转染性能比较时，我们选取了AAV-293细胞。AAV-293是进行病毒包装和重组蛋白表达较为常用的工程细胞，我们使用RFect Prime和Lipo3000分别转染GFP质粒到AAV-293细胞中，48h观察两组转染效率。结果显示，RFect Prime和Lipo3000在AAV-293细胞中的转染阳性率非常相近，均达到了90%以上（图C和D），而RFect Prime的细胞荧光似乎更为强烈。
2）在较难转染的原代细胞中的表现
为了进一步探究RFect Prime和Lipo3000的转染实力，我们在较难转染的原代细胞中也进行了实验。同样，我们将siRNA和质粒DNA分别转入原代肺癌细胞中，在24h及48h观察其转染结果。由于实验中，使用Lipo3000的实验组对原代肺癌细胞的毒性稍大，细胞死亡率较高，因此主要以RFect Prime的转染结果来和大家做个分享。根据荧光图显示，在原代肺癌细胞中，RFect Prime对质粒的转染阳性率可达85%，对siRNA的转染阳性率可达90%（图C和图D）。这样的转染结果其实是非常难得的，对于经常与原代细胞打交道的研究者们来说也是一个好消息。我们都知道，原代细胞是直接从机体分离培养的细胞，细胞膜相对较厚，而且表面有许多微绒毛和微细突起，这些结构会影响转染试剂与细胞膜的结合，从而降低转染效率。由于原代细胞对环境毒性较为敏感，在进行转染实验时，细胞的死亡率也会大大高于普通细胞株。因而，原代细胞的转染存在较大的难度，研究者往往很难寻找到一款理想的转染试剂。
二、细胞毒性
为了比较RFect Prime和Lipo3000的细胞毒性，我们在原代大鼠主动脉平滑肌细胞中进行了小核酸NC-FAM 转染。结果显示，Rfect Prime转染后的细胞死亡率只有5%左右，与空白对照的细胞死亡率几乎一致，这说明Rfect Prime的细胞毒性极低，可能与其成分主要为可降解生物材料有关。使用Lipo3000进行转染，细胞死亡率约在10%左右，比Rfect Prime略高。总体而言，两款转染试剂的细胞毒性都不算太高，研究者并不需要担心因细胞毒性太大而对实验结果产生较大的影响。如果是对毒性较为敏感的细胞株或原代细胞，使用RFect Prime转染效果可能更为理想。
三、操作简便性
转染试剂的操作简便性主要看二个方面，一方面看在实验过程中是否需要频繁的换液，另一方面看是否需要购买其它的配套试剂。使用RFectPrime，在制备转染复合物时，只需要加入实验室常备的1640或DMEM即可，不需要购买转染试剂以外的其它试剂，没有额外花费。使用Lipo3000，在制备转染复合物时，则需要加入Opti-MEM™ I减血清培养基，该试剂需要另外购买。换液方面，使用RFectPrime，在转染复合物加入细胞培养孔之后6小时，细胞生长状态良好，并不需要换液，这显然与RFectPrime的细胞毒性较低有关。使用Lipo3000，在转染复合物加入细胞培养孔之后6小时左右，建议最好更换新鲜的培养基。
总体而言，RFectPrime具有非常优异的DNA和siRNA转染性能，完全可以媲美Lipo3000。对于一些对细胞毒性较为敏感的细胞株或原代细胞，使用RFect Prime转染效果可能更为理想。对于一些希望控制研究经费的研究者，RFect Prime也是一个比较理想的选择。
