人乳腺癌细胞(MCF-7)细胞培养要点

MCF细胞是从一名69岁白人女性乳腺癌患者的胸腔积液中分离建立,常用于研究乳腺癌发病机理的研究,MCF-7属于贴壁细胞,显微镜下呈现上皮细胞形态,且保留了分化乳腺上皮的许多特性。包括:能通过胞质雌 激素受体加工雌二醇并能形成圆形复合物(domes)。该细胞含有 WNT7B 癌基因。肿瘤坏死因子α(TNF alpha)可以抑制 MCF-7 细胞生长。细胞经抗雌激素处理后能调节 胰岛素样生长因子结合蛋白 IGFBPS 分泌。

MCF-7常用DMEM培养基,含10%胎牛血清,在37℃、5%二氧化碳培养箱培养,MCF-7是一种生长缓慢的细胞系,它会以松散的三维团簇的形式出现,并伴有一些漂浮的活细胞。悬浮的活细胞可以通过离心后重新加入到培养瓶中培养。在复苏后前二代 该细胞会出现贴壁缓慢的情况,是正常现象。松散的三维团簇细胞慢慢会扩散形成一个 扁平的单层细胞。

细胞名称:人乳腺癌细胞(STR鉴定正确)

细胞简称:MCF-7

产品货号:TCH-C247

种属来源:

组织来源:乳腺

疾病特征:乳腺癌

细胞形态:上皮细胞样

生长特性:贴壁生长

培养体系:MEM+10%FBS+1%Glutamax+1%NEAA+1% Sodium Pyruvate+10 µg/mL Human recombinant insulin+1%P/S

配套培养基货号:TCH-G247

传代比例:1:3-1:6,每2-3天换液一次

传代周期:48-72 h

培养条件:气相:95%空气+5%CO2,温度:37℃

冻存条件:60%基础培养基+30%FBS+10%DMSO,液氮储存

质量检测:细菌、真菌、支原体检测均为阴性

MCF-7细胞的传代

1. 尽量吸干净培养瓶瓶或培养皿原培养基;

2. 加2-3ml 常温PBS轻轻润洗细胞,吸走润洗的PBS;

3. 培养瓶或培养皿中加适量胰酶使其正好铺匀瓶底;例如:10cm培养皿一般加入2ml 胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;

4. 将培养瓶放入37度培养箱消化;

5. 消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加入为胰酶2倍体积完全培养基终止胰酶消化;

6. 混匀细胞,贴壁细胞1100rpm离心4min,弃上清;

7. 加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶或培养皿里;

8. 补足完全培养基,将细胞放回培养箱静置培养.

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