小鼠B淋巴母细胞瘤细胞(MOPC315)培养要点

MOPC315 细胞是一种小鼠 B 淋巴细胞浆细胞瘤细胞系,常用于抗体研究和细胞培养实验。

细胞名称:小鼠B淋巴母细胞瘤细胞

细胞别称:MOPC 315; MOPC-315

产品货号:TCM-C797

种属来源:小鼠

组织来源:B淋巴细胞

疾病特征:B淋巴母细胞瘤

细胞形态:淋巴母细胞样

生长特性:悬浮生长

培养体系:DMEM-H+10% FBS+1% P/S

配套培养基货号:TCH-G797

传代比例:1:3-1:5,每2-3天换液一次

传代周期:24-48 h

培养条件:气相:95%空气+5%CO2,温度:37℃

冻存条件:60%基础培养基+30%FBS+10%DMSO,液氮储存

质量检测:细菌、真菌、支原体检测均为阴性

MOPC315细胞培养要点

① MOPC315细胞为悬浮生长。 

② MOPC315细胞有密度依赖性,MOPC315细胞密度低时,生长较慢,培养密度维持在4 ~8×105 /mL为宜;超过1.0 ×106 /mL则需要传代。 

③ MOPC315细胞对机械力较敏感。正常培养时,应尽量避免吹打力道过大。暴力吹打会使细胞分化和死细胞增加。 

④ 血清质量差异可能引起细胞状态变化,建议选用高质量的胎牛血清。

MOPC315细胞换液方法

① 补液法:培养基变黄时可补加适量(1~2mL)新鲜培养基,补加1-2次 之后,用离心的方式全部换液,离心1200rpm(约250g)3分钟。

② 半换液法:以T25瓶子为例,瓶子里装有5mL培养基。竖起瓶子静置一 段时间,待细胞沉底,小心吸出2.5mL的培养基,转移到离心管,离心1200rpm(约250g)3分钟,检查有没有沉淀,以免损失细胞;原瓶补充2.5mL新鲜培养基,离心管里若有细胞,则用新鲜培养基重悬后放回原瓶。

半换液操作示意图

③ 如果换液后第二天培养基就变得很黄,同时镜下检查未污染,说明细胞密度大,应该传代。

MOPC315细胞传代方法

① 摇晃培养瓶,把细胞摇匀,均分到两个瓶子里,每瓶再补充等量培养基。 

② 离心法:离心后计数,按照40-50万细胞/mL的密度接种到T25瓶里,瓶中培养基量以5mL为宜。不方便计数时,按1:2比例传代。

③ 死细胞或细胞碎片较多的情况下,建议用离心法传代,离心转速可适当降低(推荐800~1000rpm或160~200g)。

MOPC315细胞冻存方法

① 由于MOPC315是悬浮细胞,更易受到冻存影响,建议加大冻存密度,大约200万-300万/mL为宜,以提高复苏存活率。

② MOPC315细胞对冻存温度比较敏感,建议冻存后立即转入-80℃冰 箱,长期保存应放在液氮罐中。

③ 经测试,MOPC315使用非程序降温冻存液的复苏存活率高于程序降温冻存液,推荐使用HyCyte™一步冻存液(GUCP-R201)。

MOPC315细胞复苏方法

MOPC315细胞复苏后通常需要3-5天恢复状态,建议复苏后48小时内不要进行操作。

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