2020-05-01

生信星球 打卡第一天

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1.甲基化知识

DNA甲基化是表观遗传学领域一个重要的研究方向,真核生物中最常见的DNA修饰非5-甲基胞嘧啶(5mC)莫属了,然而在原核生物中最常见的DNA修饰方式则为N6-methyladenine (6mA),即腺嘌呤第6位氮原子甲基化修饰.

2.DNA甲基化检测手段

(1)甲基化芯片

甲基化芯片产品较少,绝大部分是illumina公司产品的,从27K到450K到850K甲基化芯片。

(2)甲基化测序

甲基化检测方法多达上百种,哪怕是基于NGS的测序技术,也有BS-Seq、MeDIP-Seq、RRBS-Seq、WGBS、MBD-Seq、SMRT 等

WGBS

WGBS(Whole Genome Bisulfite Sequence)全基因组甲基化测序,利用重亚硫酸氢盐使DNA中未发生甲基化的胞嘧啶(C)脱氨基转变成尿嘧啶(U),而甲基化的胞嘧啶保持不变,然后通过PCR将U变为A,仅有甲基化的C可以成功保留,最后通过测序就可判断CpG位点是否发生甲基化。覆盖全基因组95%的甲基化位点.

MeDIP

MeDIP(Methylated DNA Immunoprecipitation Sequencing)
甲基化 DNA 免疫共沉淀测序,先通过与5mC特异性结合的抗体加入到变性的基因组DNA片段中,富集胞嘧啶甲基化的基因组片断,然后对富集的片段进行高通量测序。

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