浅谈染色体非整体检测QF-PCR&MLPA

       最近,MRC Holland 公司MLPA染色体非整体检测试剂盒获国内进口注册证。受专利限制,目前国内染色体非整体快速检测试剂盒只能采用有荧光PCR-毛细管电泳法(QF-PCR)技术。那么PCR-毛细管电泳法(QF-PCR)和多重连接探针扩增技术(MLPA)这两种方法各自的优劣势在哪里呢?

下面就用市面上已经使用的两种试剂盒为例进行对比。

1.上海晶准 21、18、13和性染色体倍型检测试剂盒(荧光PCR-毛细管电泳法)

2. MRC Holland 公司SALSA MLPAprobemix P095 Aneuploidy

一、QF-PCR &MLPA共同点:

1.   目标染色体均为chr21、chr18、chr13以及性染色体X和Y。

2.   采用荧光多重PCR,对不同PCR产物长度差异进行电泳区分。

3.   采用仪器为PCR仪和基因分析仪,在国内很多医院均有配置。

二、QF-PCR &MLPA差异:

   下表中可见:MLPA虽然在探针数量上较QF-PCR多,但由于操作复杂,杂交、连接等导致误差放大,容易出现假阴性。MLPA判读方法为半定量方式,表现一定的局限性。MLPA的局限性表现在不能检出三倍体、不能检测母源污染(MCC),也不能对样本亲缘关系溯源,而这些QF-PCR均可以做到。

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