生物实验原理整理

1.IP与co-IP:(用于研究蛋白质相互作用。。)
免疫沉淀和免疫共沉淀都是基于抗原抗体结合的特性来实现的。
IP:在琼脂珠上插满一种蛋白A/G,这种蛋白能够稳定的结合抗体的FC部(Y型的岔口处)。再接着抗体可以和特异的抗原结合。实验中,只要往含有目的抗原的溶液里加入对应的抗体,再通过离心,(珠子带着结合的抗原抗体在下面),就可以纯化得到自己的目的抗原。
co-ip:与IP唯一不同的是,IP的目的成为初级靶分子,co-ip的对象是次级靶分子,即 抗原X作用结合着的Y。


IP-rule.png
CO-IP-SHOW.png

图片来自文献
Snipaste_2020-05-27_22-00-26.png

2.LRA:luciferase reporter assay,荧光素酶报告实验。(用于测转录因子活性,作用强度。。)
利用荧光素酶催化荧光素发出荧光的特性。
实验上,就是构建一个报告基因的质粒,在靶启动子特定片段插到荧光素酶表达基因的前面,如果待测转录因子能够激活靶启动子,荧光素酶基因就会表达,荧光素酶的表达量与转录因子的作用强度成正比。再加入特定的荧光素酶反应底物,测荧光强度即可判断转录因子有无作用和作用强度了~


LAR_show.png

图片来自文献
Snipaste_2020-05-27_22-00-26.png

3.流式细胞仪检测细胞凋亡的原理:


flow_pi_Annexin V.png

4.基因编辑-crispr/cas9
crispr(clustered regularly interspaced short Palindromic repeats)一段规律/有间隔/短的/群集性/重复/回文 序列
cas9 = 一把能够剪短DNA双链的剪刀
sgRNA = 指引者
PAM motif = 身份证
综上:sgRNA带着cas9去特定切除持有身份证的靶向序列

5.生物膜干扰实验(分子结合)


图片.png

6.趋化性实验
趋化性是指,诱导细胞向趋化因子浓度高的方向移动。


图片.png
最后编辑于
©著作权归作者所有,转载或内容合作请联系作者
  • 序言:七十年代末,一起剥皮案震惊了整个滨河市,随后出现的几起案子,更是在滨河造成了极大的恐慌,老刑警刘岩,带你破解...
    沈念sama阅读 213,254评论 6 492
  • 序言:滨河连续发生了三起死亡事件,死亡现场离奇诡异,居然都是意外死亡,警方通过查阅死者的电脑和手机,发现死者居然都...
    沈念sama阅读 90,875评论 3 387
  • 文/潘晓璐 我一进店门,熙熙楼的掌柜王于贵愁眉苦脸地迎上来,“玉大人,你说我怎么就摊上这事。” “怎么了?”我有些...
    开封第一讲书人阅读 158,682评论 0 348
  • 文/不坏的土叔 我叫张陵,是天一观的道长。 经常有香客问我,道长,这世上最难降的妖魔是什么? 我笑而不...
    开封第一讲书人阅读 56,896评论 1 285
  • 正文 为了忘掉前任,我火速办了婚礼,结果婚礼上,老公的妹妹穿的比我还像新娘。我一直安慰自己,他们只是感情好,可当我...
    茶点故事阅读 66,015评论 6 385
  • 文/花漫 我一把揭开白布。 她就那样静静地躺着,像睡着了一般。 火红的嫁衣衬着肌肤如雪。 梳的纹丝不乱的头发上,一...
    开封第一讲书人阅读 50,152评论 1 291
  • 那天,我揣着相机与录音,去河边找鬼。 笑死,一个胖子当着我的面吹牛,可吹牛的内容都是我干的。 我是一名探鬼主播,决...
    沈念sama阅读 39,208评论 3 412
  • 文/苍兰香墨 我猛地睁开眼,长吁一口气:“原来是场噩梦啊……” “哼!你这毒妇竟也来了?” 一声冷哼从身侧响起,我...
    开封第一讲书人阅读 37,962评论 0 268
  • 序言:老挝万荣一对情侣失踪,失踪者是张志新(化名)和其女友刘颖,没想到半个月后,有当地人在树林里发现了一具尸体,经...
    沈念sama阅读 44,388评论 1 304
  • 正文 独居荒郊野岭守林人离奇死亡,尸身上长有42处带血的脓包…… 初始之章·张勋 以下内容为张勋视角 年9月15日...
    茶点故事阅读 36,700评论 2 327
  • 正文 我和宋清朗相恋三年,在试婚纱的时候发现自己被绿了。 大学时的朋友给我发了我未婚夫和他白月光在一起吃饭的照片。...
    茶点故事阅读 38,867评论 1 341
  • 序言:一个原本活蹦乱跳的男人离奇死亡,死状恐怖,灵堂内的尸体忽然破棺而出,到底是诈尸还是另有隐情,我是刑警宁泽,带...
    沈念sama阅读 34,551评论 4 335
  • 正文 年R本政府宣布,位于F岛的核电站,受9级特大地震影响,放射性物质发生泄漏。R本人自食恶果不足惜,却给世界环境...
    茶点故事阅读 40,186评论 3 317
  • 文/蒙蒙 一、第九天 我趴在偏房一处隐蔽的房顶上张望。 院中可真热闹,春花似锦、人声如沸。这庄子的主人今日做“春日...
    开封第一讲书人阅读 30,901评论 0 21
  • 文/苍兰香墨 我抬头看了看天上的太阳。三九已至,却和暖如春,着一层夹袄步出监牢的瞬间,已是汗流浃背。 一阵脚步声响...
    开封第一讲书人阅读 32,142评论 1 267
  • 我被黑心中介骗来泰国打工, 没想到刚下飞机就差点儿被人妖公主榨干…… 1. 我叫王不留,地道东北人。 一个月前我还...
    沈念sama阅读 46,689评论 2 362
  • 正文 我出身青楼,却偏偏与公主长得像,于是被迫代替她去往敌国和亲。 传闻我的和亲对象是个残疾皇子,可洞房花烛夜当晚...
    茶点故事阅读 43,757评论 2 351