分子生物学基础概念

  • 转录因子Transcription Factors, TFs:是指能够以序列特异性方式结合DNA并且调节转录的蛋白质。
  • motif:转录因子与特异性DNA结合通常概括为“基序”(motif)!

下图展示:

  • 启动子、终止子


    核心启动子结构.png
  • 起始密码子、终止密码子

  • UTR、CDS、polyA

DNA-RNA结构.png

中心法则图解

Gene_structure_eukaryote_2_annotated.svg.png

常见的真核和原核表达系统的启动子(promoters)

CAG启动子

人们认识到CMV启动子的不足后,通过将不同物种的启动子“复制粘贴”到一起,构建了一系列人工启动子,比如所CAG、CBA等等启动子。CAG启动子包含CMV病毒启动子的增强子序列,鸡β-actin的启动子以及兔β-Globin的剪接受体,如图4。

image

图4. CAG启动子‍

分析来看,CAG启动子保留了CMV病毒的增强子,因此转录能力与CMV启动子不相上下,鸡β-actin启动子则为它提供了更加广泛的表达谱,因此CAG启动子可以用于大多数基因编辑策略。举个栗子,mT/mG小鼠就是通过CAG启动子驱动ACTB-tdTomato.-EGFP在膜上表达,无Cre重组酶时表达tdTomato,有Cre重组酶时表达GFP,指示Cre鼠的特异性。

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