慢乙肝患者接受聚乙二醇干扰素α（PEG IFNα）治疗的临床疗效存在显著个体差异，更好地了解与PEG IFNα疗效相关的病毒学及宿主因素可能有助于提高疗效，实现更好的个体化治疗。近期已有多项研究报道三基序蛋白（TRIM）家族成员如TRIM22、TRIM26 rs116806878可作为预测PEG IFNα治疗应答的潜在生物标志物（二）。
重庆医科大学附属第一医院的秦波教授团队既往已发表研究证实IFNα可诱导TRIM38的表达，TRIM38高表达可抑制HBV的复制及基因表达，并增强IFNα的抗病毒作用，治疗过程中较高的TRIM38水平是预测PEG IFNα治疗应答的有效生物标志物。近期，该团队再次发表研究表明，在PEG IFNα治疗HBeAg阴性慢性HBV感染者时，早期更高的TRIM19及TRIM38水平均与较好的治疗应答以及更好的HBsAg清除率有关，治疗24周时 TRIM19与TRIM38 mRNA的变化值可较好预测其对PEG IFNα的治疗应答。
研究方法：
01、入组人群
该前瞻性观察队列研究纳入43例于2021年1月至2022年1月期间在重庆医科大学附属第一医院接受PEG IFNα治疗的HBeAg阴性慢性HBV感染者。患者年龄为18 - 65岁，诊断标准依据AASLD2018指南：HBsAg阳性，HBeAg阴性，HBeAb阳性，HBcAb阳性，HBV DNA < 2000 IU/mL，肝功能正常，无或轻度肝组织炎症/肝纤维化。此外，研究还纳入32例初治慢乙肝（CHB）患者及19例健康对照者（HCs）。
02、HBeAg阴性慢性HBV感染者经PEG IFNα治疗后的分组
应答组（R组）为PEG IFNα治疗48周后，HBV DNA下降> 2 log10 IU/mL或HBsAg迅速下降（HBsAg下降> 1 log10 IU/mL或HBsAg清除）的患者；其余患者归为无应答组（NR组）。
血清学应答组（SR组）为在PEG IFNα治疗期间获得HBsAg清除或HBsAg血清学转换的患者；其余患者归为无血清学应答组（NSR组）。
03、检测指标
HBeAg阴性慢性HBV感染者接受PEG IFNα治疗48周，在基线和此后每12周检测HBsAg、HBV DNA、肝功能和血常规。在基线、12周和24周后采集外周血样本，分离PBMCs并检测TRIM19和TRIM38 mRNA水平。初治CHB患者和健康对照者仅在基线时接受检测。
研究结果
一. PEG IFNα治疗HBeAg阴性慢性HBV感染者48周的HBsAg清除率为25.58%
HBeAg阴性慢性HBV感染者经PEG IFNα治疗48周时HBsAg清除率为25.58%。基线时，健康对照（HCs）组、初治CHB患者组和PEG IFNα治疗的HBeAg阴性慢性HBV感染者组间的性别、年龄、ALT、AST及白细胞计数（WBC）无显著性差异（P 均 > 0.05）。
各组患者的基线特征
43例HBeAg阴性慢性HBV感染者接受PEG IFNα治疗48周，1例在PEG IFNα治疗12周时获得HBsAg清除，24周、36周和48周时HBsAg清除率分别为9.30%、11.63%和25.58%。24周、36周和48周的HBsAg血清学转换率分别为6.98%、9.30%和13.95%。
PEG IFNα治疗期间HBeAg阴性慢性HBV感染者的HBsAg清除率及血清学转换率
二. 各人群基线时TRIM19/38 mRNA水平及其与病毒学指标的关系
01、初治慢乙肝患者的TRIM19/38 mRNA水平显著低于健康对照者
比较基线时健康对照组和初治CHB组PBMCs中的TRIM19/38 mRNA水平，结果显示初治CHB组PBMCs中TRIM19（P = 0.0429）和TRIM38（P = 0.0120）mRNA水平显著低于健康对照组（图A,B）。
基线时初治CHB患者与健康对照者PBMCs中
TRIM19 mRNA（A）和TRIM38 mRNA（B）水平比较
02、HBeAg阴性慢性HBV感染者基线时的TRIM19/38 mRNA水平与HBV DNA及ALT水平呈负相关
分析基线时HBeAg阴性慢性HBV感染者的PBMCs中TRIM19/38 mRNA水平与HBV病毒学指标的相关性。结果显示TRIM19和TRIM38 mRNA水平与HBsAg水平无显著相关（图A,D）。TRIM19 mRNA水平（r = -0.1216, P = 0.0219）及TRIM38 mRNA水平（r = -0.1591, P = 0.0081）与HBV DNA均呈负相关（图B,E）。TRIM19 mRNA水平（r = -0.2379, P = 0.0009）及TRIM38 mRNA水平（r = -0.1758, P = 0.0051）与ALT均呈负相关（图C,F）。
基线时IHCs的TRIM19/38 mRNA水平与HBsAg（A,D）、
HBV DNA（B,E）和ALT（C,F）的相关性分析
三. HBeAg阴性慢性HBV感染者的TRIM19/38 mRNA水平与PEG IFNα的治疗应答及临床治愈的关系
01、PEG IFNα治疗早期较高的TRIM19/38 mRNA水平与治疗应答更佳相关
根据PEG IFNα治疗第48周时HBV DNA和HBsAg水平的变化将HBeAg阴性慢性HBV感染者分为应答组（R组，n = 16）和无应答组（NR组，n = 27）。基线时，两组的血清HBsAg水平相似，但R组的HBV DNA水平显著低于NR组（P = 0.0022），R组的ALT水平显著高于NR组（P = 0.0025）。治疗12周和24周时R组的HBsAg水平（P = 0.0004, 12w；P < 0.0001, 24w）显著低于NR组，ALT水平（P = 0.0019, 12w）和AST水平（P = 0.0001, 12w）显著高于NR组。
HBeAg阴性慢性HBV感染者中应答组（R组）
与无应答组（NR组）的临床特征比较
相较于基线，治疗24周时R组的TRIM19 mRNA水平显著更高（P = 0.0203），12周和24周时R组的TRIM38 mRNA水平均显著更高（P = 0.0042; P = 0.0002）（图A,B）。
HBeAg阴性慢性HBV感染者中R组治疗期间
TRIM19 mRNA（A）和TRIM38 mRNA（B）水平的动态变化相较于基线，NR组治疗12周和24周时TRIM19/38 mRNA水平无明显升高（图C,D）。
HBeAg阴性慢性HBV感染者中NR组治疗期间
TRIM19 mRNA（C）和TRIM38 mRNA（D）
水平的动态变化比较治疗期间R组和NR组的TRIM19 mRNA和TRIM38 mRNA水平发现，治疗24周时R组的TRIM19 mRNA水平显著高于NR组（P = 0.0061）。R组的TRIM38 mRNA水平在12周和24周时均显著高于NR组（P = 0.0081; P = 0.0001）（图E,F）。
比较HBeAg阴性慢性HBV感染者中R组和NR组治疗前、
治疗12周和治疗24周时TRIM19 mRNA（E）
和TRIM38 mRNA（F）水平比较提示在PEG IFNα治疗早期，R组的TRIM19/38 mRNA水平高于NR组，较高的TRIM19/38 mRNA水平可能与PEG IFNα治疗应答更佳相关。
02、PEG IFNα治疗24周时TRIM19/38 mRNA水平更高可能与更高的HBsAg清除率或血清学转换率相关
根据是否获得HBsAg清除或血清学转换将PEG IFNα治疗的HBeAg阴性慢性HBV感染者分为血清学应答组（SR组, n = 11）和无血清学应答组（NSR组, n = 32）。基线时两组的HBV DNA、ALT和AST水平相似，但SR组的血清HBsAg显著低于NSR组（P = 0.0006）。PEG IFNα治疗后SR组的HBsAg（P < 0.0001, 12w; P < 0.0001, 24w）显著低于NSR组；SR组的ALT（P = 0.0001, 12w）和AST（P = 0.0001, 12w）水平显著高于NSR组。
HBeAg阴性慢性HBV感染者中血清学应答组（SR组）与
无血清学应答组（NSR组）的临床特征比较
治疗12周时，SR组和NSR组的TRIM19/38 mRNA水平均有所升高，但差异无统计学意义。治疗24周时，SR组的TRIM19（P = 0.0296）和TRIM38（P = 0.0041）mRNA水平均显著高于NSR组（图A,B）。提示较高的TRIM19/38 mRNA水平可能与PEG IFNα治疗早期更高的HBsAg清除率或血清学转换率有关。
HBeAg阴性慢性HBV感染者中SR组和NSR组治疗前、
治疗12周和24周时TRIM19 mRNA（A）
和TRIM38 mRNA（B）水平比较
03、从基线至治疗24周时的TRIM19/38 mRNA变化值可较好预测HBeAg阴性慢性HBV感染者对PEG IFNα的治疗应答
进一步评估HBeAg阴性慢性HBV感染者的TRIM19/38 mRNA水平与PEG IFNα治疗应答之间的关系发现，R组从基线至治疗24周时的TRIM19 mRNA水平变化值（FC-TRIM19wk24/wk0）显著高于NR组（P = 0.0139, 图A）；R组从基线至治疗24周时的TRIM38 mRNA水平变化值（FC-TRIM38wk24/wk0）也显著高于NR组（P = 0.0352, 图B）。
基线至治疗24周，R组和NR组PBMCs中
TRIM19 mRNA（A）和TRIM38 mRNA（B）水平的变化
受试者工作特征（ROC）曲线分析显示，FC-TRIM19/38wk24/wk0均能较好预测HBeAg阴性慢性HBV感染者对PEG IFNα的治疗应答。FC-TRIM19wk24/wk0的AUC为0.694 (P = 0.0348，图C)，最佳临界值为1.263，灵敏度为48.15%，特异性为87.50%。FC-TRIM38wk24/wk0的AUC为0.757（P = 0.0053，图D），最佳临界值为1.381，灵敏度和特异性分别为70.37%和87.50%。
FC-TRIM19/38wk24/wk0预测HBeAg阴性慢性HBV感染者
对PEG IFNα治疗应答的ROC曲线图
肝霖君有话说
本研究的人群为AASLD指南定义的HBeAg阴性慢性HBV感染者，对HBsAg水平无阈值要求，因此其HBsAg清除率与我国指南定义的非活动性HBsAg携带人群（IHCs）有差异。研究发现这类人群基线时TRIM19/38 mRNA水平与HBV DNA和ALT呈负相关。可能是由于TRIM19/TRIM38被HBV抑制进而导致TRIM19/38 mRNA水平下降，证明TRIM19/38可能与HBV感染有关。
进一步研究显示，PEG IFNα早期治疗应答组的TRIM19/38 mRNA水平显著高于未应答组，治疗24周时血清学应答组的TRIM19/38 mRNA水平显著高于无血清学应答组；且基线至治疗24周时TRIM19/38 mRNA水平的变化值均可较好预测其对PEG IFNα的治疗应答。既往有研究探索证实HBcrAg、HBsAg的组成（大表面蛋白和中表面蛋白）及基线血清免疫球蛋白G（IgG）等也可以预测PEG IFNα治疗IHCs人群的HBsAg清除（相关链接一、三）。随着抗病毒治疗适应证的不断拓展以及各类人群临床治愈证据的不断累积，探索更多有利于临床实践的预测指标非常有价值。
参考文献：
Luo H, Tan G, Hu X, et al. Triple motif proteins 19 and 38 correlated with treatment responses and HBsAg clearance in HBeAg-negative chronic hepatitis B patients during peg-IFN-α therapy[J]. Virol J. 2023; 20(1): 161.
