【氢气控癌:理论和实践】氢气抑制癌症的动物模型实验(一)

氢气抑制肺癌的细胞学

裸鼠腋下成瘤实验中,发现吸氢氧混合气体组的裸鼠瘤块要明显小于正常组瘤块大小;细胞形态学上,加入氢气后,癌细胞的数量降低和外观发生空泡化。

细胞学研究结果表明,氢分子降低了A549细胞的增殖速率,同时抑制了细胞迁移的能力,本实验提示氢气吸入对非小细胞肺癌患者有辅助治疗作用,为氢分子对肺癌的防治提供了一定的实验基础。

1、氢气对实验性肿瘤形成的影响

方法:将BALB/C裸鼠6只,平均分成A和B两组,分别为正常组和吸氢组(吸人氢氧混合气体)。

注射肿瘤细胞成瘤:将A549细胞扩增至一定数量后,将细胞用胰蛋白酶消化、收集;在SPF环境下观察裸鼠3天,状况良好,准备接种细胞;超净台内,75%酒精消毒裸鼠注射部位皮肤,在裸鼠后肢注射含5x10细胞的细胞悬液;刺人点距注射点约1cm,形成一隆起皮丘,防止液体漏出后消毒皮肤,观察成瘤情况。

干预方法:A组裸鼠成瘤后不做任何处理,正常环境下饲养;B组裸鼠成瘤后每天给予氢氧混合气体(66.7%H2+33.3%O2)吸入,每天6小时,流量3升/分钟,共14天。

实验结果:正常组裸鼠瘤块增长速度在3周前呈现缓慢递增趋势,3周后则为快速增长;与正常组相比,吸氢组的瘤块增长速度则显得持续缓慢。

01.正常组和吸氢组数据

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最终形成的瘤块大小,吸氢组裸鼠要明显小于正常组。

同时,在实验过程中,发现正常组的裸鼠饮食量明显少于吸氢组。大体解剖上,正常组裸鼠的肺、肝脏和肠都明显肿大,而吸氢组裸鼠的脏器都相对正常。

另外还发现,正常组瘤块生长区域有较多的微血管增生,而吸氢组则无此现象,微血管较少。

2、细胞形态学观察

方法:将A549细胞扩增至一定数量后,用胰蛋白酶消化,收集;重新铺板于两个35皿中,分为两组:正常细胞培养箱培养和氢氧混合气体培养箱培养(66.7% H2+33.3%O2);每隔两天换液一次,长满后进行传代;传代的A549细胞继续按照亲代的培养环境进行培养;持续观察两组细胞至第10代。

结果:第一代时,两组气体环境下培养的细胞无明显差异,增殖情况类似,细胞状态较好;第5代时,氢氧混合气体组的A549细胞的增殖受到抑制,细胞体积增大,细胞死亡较多;第10代时,氢氧混合气体组的细胞出现了更多的空泡化。

02.正常组和吸氢组数据

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文章来源:《氢气控癌:理论和实践》

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