FluoTag-X2抗ALFA是一种荧光标记的单域抗体(sdAb),能够特异性地检测小型、合理设计的ALFA标签。它能够直接且高度特异性地荧光检测ALFA标记的目标,无需使用二抗。
FluoTag-X2抗ALFA基于NanoTag内部开发的一种单域抗体(sdAb),能够特异性识别小型、合理设计的表位标签ALFA,其解离常数约为26皮摩尔。该系统的完整特性描述可以在2019年发表于《自然·通讯》的一篇开源文章中找到。
无论样本是活体还是使用4%多聚甲醛、2%戊二醛或甲醇固定的,FluoTag-X2抗ALFA都能以单价高亲和力和特异性结合。像所有FluoTag-X2试剂一样,每个单域抗体(sdAb)上都特异性地结合了两个荧光团。
由于NanoTag的FluoTags体积小,ALFA标签也短(15个氨基酸;PSRLEEELRRRLTEP),目标表位与每个荧光团之间的距离小于3纳米。感兴趣的蛋白质可以在N端、C端或域间使用NanoTag的ALFA标签进行标记。ALFA标记的目标蛋白也可以使用NanoTag具有生理洗脱能力的ALFA选择器树脂系列与复合物或伴侣结合物进行免疫沉淀或原生纯化。
因此,这种ALFA标签以及配套的FluoTags-X2抗ALFA和ALFA选择器树脂是完美选择,适用于想要与生化纯化、质谱分析或任何其他高端应用相结合的基于荧光的实验。
FluoTags可以配备单个荧光团以实现更定量的读数(FluoTag-Q),每个单域抗体配备两个荧光团(FluoTag-X2)。
艾美捷FluoTag-X2抗ALFA AbberiorStar635P:
货号:N1502-AB635P-L
克隆号:1G5
宿主:羊驼
生产来源:大肠杆菌
应用:免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、西方印迹(WB)
稀释比例:1:500(相当于最终浓度5纳摩尔)
靶标:ALFA标签
特异性:它识别ALFA标签(SRLEEELRRRLTE)。
配方:单个sdAb克隆从含有2% BSA(美国来源)的pH 7.4的PBS中冻干。
运输:常温
储存:含有冻干试剂的安瓿可在2-8°C下保存长达12个月。复溶后,可在-80°C下保存长达6个月。工作分装可在-20°C下保存长达4周。
注意:仅供体外/研究使用。无毒、无害、无传染性。

使用FluoTag-X2 Sufo Cyanin 3抗ALFA sdAb(编号N1502,稀释比例1:1000;红色)对表达ALFA标签融合蛋白的PFA固定脑切片进行免疫染色。细胞核用DAPI(蓝色)可视化。
文献参考:
1、Götzke H, Kilisch M, Martínez-Carranza M, Sograte-Idrissi S, Rajavel A, Schlichthaerle T, Engels N, Jungmann R, Stenmark P, Opazo F, Frey S. The ALFA-tag is a highly versatile tool for nanobody-based bioscience applications. Nat Commun. 2019 Sep 27;10(1):4403. doi: 10.1038/s41467-019-12301-7. PMID: 31562305; PMCID: PMC6764986.
2、Reinders NR, van der Spek SJF, Klaassen RV, et al. Amyloid-β-Driven Synaptic Deficits Are Mediated by Synaptic Removal of GluA3-Containing AMPA Receptors. J Neurosci. 2025;45(9):e0393242024. Published 2025 Feb 26. doi:10.1523/JNEUROSCI.0393-24.2024 (N1502-AF647-L; IF; rat hippocampal neurons)
3、Hodel AW, Rudd-Schmidt JA, Noori T, et al. Acidic pH can attenuate immune killing through inactivation of perforin. EMBO Rep. Published online January 9, 2025. doi:10.1038/s44319-024-00365-6 (N1502-AF568-L; IF of ALFA-PRF release in artificial immune synapses)