SFINX: 一个基于Shiny部署的鉴定蛋白互作关系平台

目前研究蛋白质互作方法有很多,传统的方法是将天然蛋白免疫沉淀与质谱检测结合(CoIP-MS),另外流行的还有亲和纯化/质谱法(AP-MS),与CO-IP类似,它使用感兴趣的诱饵蛋白(bait proteins)上的表位标签和捕获探针来识别协同的猎物蛋白,不需要为每个新的诱饵蛋白购买或者开发特定抗体,得到的融合蛋白可以用链霉亲和素(strep)磁珠来亲和纯化,用生物素洗脱最终得到蛋白复合物。

优势:

  1. AP/MS技术得到的互作蛋白是在细胞内与诱饵蛋白结合的,符合体内真实生理情况,得到的结果可信度高。

  2. 不像COIP采用抗体拉取蛋白复合物,可以有效的避免抗体的污染;得到的洗脱液可以直接做溶液酶解和质谱,大大减少了跑胶引起的蛋白损失。

这里介绍一个基于R语言Shiny部署的在线蛋白互作分析平台SFINX, 网络可视化部分利用之前介绍过的networkD3包。

image-20220323134701225

地址:http://sfinx.ugent.be/

使用

Info部分提供了详细的用户使用说明(主要有5部分):

  1. Data Input(输入框页面介绍)
image-20220323145319575
  1. Example of "Basic data" file (基本的文件输入格式)
image-20220323145333497
  1. Immediately after input of data(筛选过滤后的互作表格)
image-20220323152024940
  1. Data input inadvanced SFINX (高级分析,参数更多)

  2. Imediately after input od data in advanced SFINX

具体信息直接去网站上看即可

实战

这里找到课题组老师17年一篇NC上的主图,用的即使这种方式绘制的图形,附件中也提供了数据分析的输入文件,我们用来实操一下。

2017, NC

需要准备两个文件

  1. 蛋白组结果文件 Basic data(各样本肽段数) :
image-20220323152628923
  1. Bait indentities(诱饵蛋白列表):
image-20220323152722843

点击Analysis界面,分别上传两个数据,右侧Filtered interactions 界面即可显示出诱饵蛋白与捕获蛋白直接的作用系数以及Pvalue

image-20220323152936791

Distribution显示SFINX score的分布

SFINX score distribution

点击Network即可看到蛋白互作网络,深蓝色填充的节点即为我们的诱饵蛋白。

image-20220323153241953

其实SFINX除了处理AP/MS这类数据之外,该方法理论上也适用于一些普通蛋白质组数据中,若已经有一些关键蛋白想找寻其它互作蛋白时,除了利用常规的String数据库根据先验信息获取外,此方法也是一种不错的选择~

参考文献

  1. SFINX: straightforward filtering index for affinity purification-mass spectrometry data analysis. J Proteome Res (2015) Titeca, K. et al.

  2. A conserved ankyrin repeat-containing protein regulates conoid stability, motility and cell invasion in Toxoplasma gondii Nature Communications (2017) Long.et al.

©著作权归作者所有,转载或内容合作请联系作者
  • 序言:七十年代末,一起剥皮案震惊了整个滨河市,随后出现的几起案子,更是在滨河造成了极大的恐慌,老刑警刘岩,带你破解...
    沈念sama阅读 194,088评论 5 459
  • 序言:滨河连续发生了三起死亡事件,死亡现场离奇诡异,居然都是意外死亡,警方通过查阅死者的电脑和手机,发现死者居然都...
    沈念sama阅读 81,715评论 2 371
  • 文/潘晓璐 我一进店门,熙熙楼的掌柜王于贵愁眉苦脸地迎上来,“玉大人,你说我怎么就摊上这事。” “怎么了?”我有些...
    开封第一讲书人阅读 141,361评论 0 319
  • 文/不坏的土叔 我叫张陵,是天一观的道长。 经常有香客问我,道长,这世上最难降的妖魔是什么? 我笑而不...
    开封第一讲书人阅读 52,099评论 1 263
  • 正文 为了忘掉前任,我火速办了婚礼,结果婚礼上,老公的妹妹穿的比我还像新娘。我一直安慰自己,他们只是感情好,可当我...
    茶点故事阅读 60,987评论 4 355
  • 文/花漫 我一把揭开白布。 她就那样静静地躺着,像睡着了一般。 火红的嫁衣衬着肌肤如雪。 梳的纹丝不乱的头发上,一...
    开封第一讲书人阅读 46,063评论 1 272
  • 那天,我揣着相机与录音,去河边找鬼。 笑死,一个胖子当着我的面吹牛,可吹牛的内容都是我干的。 我是一名探鬼主播,决...
    沈念sama阅读 36,486评论 3 381
  • 文/苍兰香墨 我猛地睁开眼,长吁一口气:“原来是场噩梦啊……” “哼!你这毒妇竟也来了?” 一声冷哼从身侧响起,我...
    开封第一讲书人阅读 35,175评论 0 253
  • 序言:老挝万荣一对情侣失踪,失踪者是张志新(化名)和其女友刘颖,没想到半个月后,有当地人在树林里发现了一具尸体,经...
    沈念sama阅读 39,440评论 1 290
  • 正文 独居荒郊野岭守林人离奇死亡,尸身上长有42处带血的脓包…… 初始之章·张勋 以下内容为张勋视角 年9月15日...
    茶点故事阅读 34,518评论 2 309
  • 正文 我和宋清朗相恋三年,在试婚纱的时候发现自己被绿了。 大学时的朋友给我发了我未婚夫和他白月光在一起吃饭的照片。...
    茶点故事阅读 36,305评论 1 326
  • 序言:一个原本活蹦乱跳的男人离奇死亡,死状恐怖,灵堂内的尸体忽然破棺而出,到底是诈尸还是另有隐情,我是刑警宁泽,带...
    沈念sama阅读 32,190评论 3 312
  • 正文 年R本政府宣布,位于F岛的核电站,受9级特大地震影响,放射性物质发生泄漏。R本人自食恶果不足惜,却给世界环境...
    茶点故事阅读 37,550评论 3 298
  • 文/蒙蒙 一、第九天 我趴在偏房一处隐蔽的房顶上张望。 院中可真热闹,春花似锦、人声如沸。这庄子的主人今日做“春日...
    开封第一讲书人阅读 28,880评论 0 17
  • 文/苍兰香墨 我抬头看了看天上的太阳。三九已至,却和暖如春,着一层夹袄步出监牢的瞬间,已是汗流浃背。 一阵脚步声响...
    开封第一讲书人阅读 30,152评论 1 250
  • 我被黑心中介骗来泰国打工, 没想到刚下飞机就差点儿被人妖公主榨干…… 1. 我叫王不留,地道东北人。 一个月前我还...
    沈念sama阅读 41,451评论 2 341
  • 正文 我出身青楼,却偏偏与公主长得像,于是被迫代替她去往敌国和亲。 传闻我的和亲对象是个残疾皇子,可洞房花烛夜当晚...
    茶点故事阅读 40,637评论 2 335

推荐阅读更多精彩内容