用primer5设计qRT-PCR引物

设计原则:(如果没得选,这些原则也可适当放宽)

获取基因fasta文件

在NCBI-PMC-Gene搜索框Home - Gene - NCBI里输入需要的基因,注意搜索框前面得选择Gene。选择所需要的基因片段,一般是NR开头,点击FASTA,可以得到一个FASTA文件。

网站上下载得到的文件

打开primer5,file→open→DNA sequence,选择刚刚下载的文件。

选中序列→add→OK

而后就到了下图所示页面,点击Primer

得到如下图,点击search

弹出如下新窗口

根据下图进行选择

点击OK后得到下图

此时即可再根据前述原则来选择自己需要的引物啦~

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