Human Protein Atlas(简称HPA)数据库(https://www.proteinatlas.org/),2003年由瑞典 Knut & Alice Wallenberg基金会创建,它致力于提供全部24000多种人类蛋白质的组织和细胞分布信息,检查每一种蛋白质在多种人类正常组织、肿瘤组织、细胞系和血液细胞内的分布和表达情况,其结果用免疫组化染色图表示,并有专业人员标引。资源中的所有数据都开放访问。
那HPA数据库都有什么内容呢?接下来请跟着小编的节奏我们来了解一下HPA数据库。首先,我们在搜索栏输入目的基因或蛋白(以TP53为例)。
搜索跳转新的页面,包括对该基因或蛋白的描述,以及证据可靠性等级和各种图谱结果(Tissue、Brain、Single cell、Pathology、Disease、Immune、Blood、Subcell、Cell line、Structure、Interaction)。每个图谱都有圆形标识,完整圆形表明证据级别最高(enhanced),其次是3/4(supported),1/2(approved),1/4(uncertain),N/A表示目前无相关数据或相关数据较少。
选择目标基因/蛋白后,能看到基因/蛋白的“Summary”栏信息,包括基因/蛋白的基础信息,蛋白表达和定位信息、组织RNA表达信息、免疫细胞的特异性和表达簇、癌症的预后及特异性、细胞系相关信息、血液中的蛋白质信息及蛋白质功能信息。
在左侧的“ANTIBODY DATA”中可以查阅抗体和干扰RNA的表达情况。The Human Pathology Atlas数据库中的蛋白质,都有对应抗体的上百张不同实验类型验证结果图,包含IHC、WB、IF等。
一些比较常用的专栏
“TISSUE”栏,主要包括一般信息(基因名称,描述,蛋白分类,预测位置,转录本数目),蛋白图谱信息(RNA表达组织特异性,RNA表达组织分布,蛋白证据等级,蛋白表达定位),免疫组化数据可靠性(数据可靠性,评分,相应抗体)。
下拉页面我们能发现RNA和蛋白表达图谱,按照人体器官分布,左侧显示的是RNA表达,右侧是蛋白的表达。我们能发现该基因/蛋白在不同的性别的不同器官表达量有差异。
点击也可以查看到基因/蛋白在不同系统中的器官中的表达情况。
HPA整理并提供了三个转录组学数据,分别是HPA,GTEx,和Consensus。
HPA也整理并提供查阅不同抗体在不同器官中的适用性数据资料,方便我们在实验设计前选择合适的抗体。
“PATHOLOGY”栏,存在General information, Human protein atlas information, 可以选择不同的肿瘤,每个肿瘤类型提供数十个病人的年龄、性别、人种、癌症阶段、预后时间,以及生存散点图、生存分析、对应的肿瘤组织IHC染色结果图等信息。
同时该专栏还会有不同的组织器官/肿瘤组织的IHC的染色结果图,如果在工作中没有做临床样本实验,很多文章也会引用摘录这里的结果作为佐证。
“SUBCELL”栏,存在General information,Human protein atlas information,Single cell types以及Single cell tissue。在这个专栏里我们能看到该蛋白在细胞中的表达位置。
我们可以查阅基因/蛋白在不同系统中细胞系中表达情况(后面也有Cell line专栏)。
Subcell能够告诉我们基因表达的空间位置以及表达强度。
siRNA相关能告诉我们RNA干扰后的表达水平,能作为生信分析时湿实验验证的数据补充。
“CELL LINE”栏,能看到该基因/蛋白在不同的组织中不同细胞系的RNA表达量。但不如CCLE详细,如何更优的选择实验所用的细胞系,后续小编也会介绍给大家。
“STRUCTURE”栏,主要展示了TP53的基本信息,此处还提供了一些有用的外链数据库,比如Uniprot数据库,便于快速查询TP53的其它关键信息,如氨基酸序列、长度、蛋白功能和二、三级结构等。
“INTERACTION”栏,收录了与目标蛋白相互作用的各种蛋白,十分齐全。同时进行了直接作用和间接作用分类,作用级别排序,甚至对互作的所有蛋白按照定位、组织特异性和蛋白类型进行分类标注。
HPA数据库网站列出了蛋白抗体的详细信息,包括供应商(Sigma-Aldrich)、来源物种(兔/鼠)、单/多抗、纯化方法等。提供了每种抗体已有的具体实验结果,包括免疫荧光、免疫组化和WB等,这些信息可为大家选择抗体提供指导。提供了细胞尺度下的蛋白表达情况,其中比较关键的信息是蛋白在不同细胞类群、以及同一细胞内的空间分布情况,这些数据以免疫检测实验结果展示,为后续实验参考提供了极大的便利。
HPA数据库的内容太丰富了,今天分享的只是数据库的一小部分内容,其它部分还请大家自行探索哟,后续我们还会分享更多的关于HPA数据库的功能,包括如何使用HPA数据库进行文章实验补充。