普通引物 和 qPCR引物
普通PCR引物：目的是获得目的基因，对非特异性反应 和 引物二聚体 要求不严格
RT-PCR 引物：目的是让目的基因按照理论值扩增，对扩增效率、特异性及引物二聚体要求严格。
引物设计基本原则
一、引物设计
以CRTAM为例
[1] 打开NCBI首页，对话框下拉选择“Gene”，输入“CRTAM”
Step 1
[2] 点击对应物种的Gene
Step 2
[3] 点击右侧“NCBI References Sequences (RefSeq)”
Step 3
[4] 选择对应剪切体
若希望设计覆盖所有剪接体的引物，参考：
【技术分享】qPCR引物设计有妙招 - 知乎 (zhihu.com)
【技术】多个转录变体间保守序列的查找 -生工生物-生命科学产品与技术服务 (sangon.com)
Step 4
[5] 选择“Pick Primers”
Step 5
[6] 修改参数
Step 6
[7] 结果
Step 7
二、引物特异性检验
理想结果
不理想结果
