DNA是细胞的遗传物质，其结构中包含4种碱基(A 、T 、G 、C),其中胸腺嘧啶核苷 (TdR) 是DNA特有的碱基，也是DNA合成的必需物质，因此用同位素³H标记TdR即H-TdR 作为 DNA合成的前体能掺入DNA的合成过程中，通过测定细胞的放射性强度，可以反映细胞DNA的 代谢及细胞增殖情况。³H-TdR掺入法具有敏感性高、客观性强且重复性好等特点，但是需在专 门的放射性实验室内进行，同时还存在放射性核素污染的问题。
方法与步骤
(1)将处于对数生长期的细胞制成细胞密度为3×10⁵/ml(根据具体情况而定)的单细胞悬 液，接种于24孔培养板中，每孔1ml; 然后将培养板置于CO₂孵箱中在37℃、5%CO₂及饱和湿度条件下培养一定时间。
(2)在细胞处于对数生长期时每孔加100μl 配制的³H-TdR液体，使其终浓度为3.7×10⁸Bq/ml; 根据实验要求继续培养1~24小时。
(3)小心吸弃各培养孔中的培养上清液，终止培养；用HBSS洗涤细胞2次，然后加2ml预冷 的10%TCA,放置10分钟(如果细胞松散，应先用甲醇固定细胞10分钟)。
(4)用10%TCA重复洗涤2次，5分/次。
(5)加500 μl 0.3mol/L NaOH至各培养孔，60℃处理30分钟，然后使之冷却至室温。
(6)收集上述各培养孔内的裂解液，移入闪烁瓶中，加5ml闪烁液，用液体闪烁计数仪测定 每分钟脉冲数(cpm), 结果以cpm/10⁶表示。
