01细胞
细胞——目前我们所发现的生物体基本的结构和功能单位,是一切生命活动的基础。
尽管自Robert Hooke于1665年发现并命名cell至今已经过去三百五十多年了,我们对于细胞的了解仍然少之又少。
所有的生物书上都会写,生物体是由细胞所组成,例如我们人体:细胞-组织-器官-系统-个体;
但究竟存在多少种不同的细胞、它们都有什么作用以及它们如何发生改变?就以上问题,大量科学家不断地进行探索,期望有有效的技术手段,可以完整地检查单个细胞的成分,包括在细胞,甚至分子水平上鉴定和治疗疾病,因此单细胞技术应运而生。
02人类细胞图谱计划
有这样一位大佬名叫Aviv Regev,被Nature称作为“人类细胞图谱研究先锋”(Nature的图太长太大我就不放了)
来看一下她是做啥的,拿了啥奖
Our work focuses on dissecting complex molecular networks to determine how they function and evolve in the face of genetic and environmental changes, as well as during differentiation, evolution and disease.
剖析复杂的分子网络,以确定它们在遗传和环境变化以及分化,进化和疾病过程中如何发挥作用和进化。
The Regev lab is no longer accepting students.
学生只会拖慢我做科研的进度
Aviv Regev教授长期以来一直在寻找探索复杂的基因网络在单个细胞中的运作机制的方法,并想了解各个细胞中这些网络有何差异,以及最终各种细胞群体如何协同工作,这些问题的答案将从本质上揭示细胞如何构建复杂的生物体。
2016年末,Regev帮助推出了继人类基因组计划(Human Genome Project)之后又一重磅项目,“国际人类细胞图谱计划(Human Cell Atlas)”,准备对人体中所有(估计37万亿个)细胞进行分类和测序,另外该项目还旨在发现和表征人体内所有可能的细胞状态——成熟和不成熟、满负荷和充分工作状态。
换句话说,HCA想要表征一切人体细胞,覆盖所有组织和器官,描绘健康人体的微观参考图!!
要知道现在10X单细胞制备平台10x Genomics Chromium Controller仪器一台约80万人民币;一套16反应的10X 3’v3转录组试剂约30万;测序所需费用与测序深度有关,如果一个样品捕获10000个细胞,按照每个细胞100K reads的饱和深度去测序,每个样品需要花费2万元测序费;从细胞到数据,每个样品约花费4万,这还没有包括样品前期处理的精力和成本、建库必须的试剂耗材和人工技术服务等等。
这可是37万亿个细胞啊!!!!
在HCA计划中,单细胞测序技术将会发挥巨大的作用!
深入了解点击https://www.medsci.cn/article/show_article.do?id=9691116906be
03单细胞组学
比单细胞测序成名更早的词——组学(Omics),英文词根"-ome"表示一类个体的系统集合。
如同一场技术革命的东风,"组学"注定将吹遍并改变我们生存社会的每一个角落。
——Stephen Friend《Opinion: Thinking Outside the Genome》
随着科学研究的进展,人们发现单纯研究某一方向无法解释全部生物医学问题,科学家就提出从整体的角度出发去研究人类组织细胞结构、基因、蛋白及其分子间相互的作用,通过整体分析反映人体组织器官功能和代谢的状态,为探索人类疾病的发病机制提供新的思路。
例如转录组学(Transcriptomics)是在整体水平上研究细胞中基因转录的情况及转录调控规律的一门学科;
代谢组学(Metabolomics)研究生物体(包括细胞、组织或个体)在不同条件下所产生的代谢产物的变化。
或者我们来看一个英文解释
蛋白组学
Proteomics includes not only the identification and quantification of proteins, but also the determination of their localization, modifications, interactions, activities, and, ultimately, their function。
简单来说,单独研究某个方向不顺利,换个思路,结合多个方向进行研究,进而解决单一研究解决不了的问题,这就叫组学。
就好像:想要一款产品获得成功,需要宣传、技术研发、售后服务等许多部门统筹进行,单一进行技术研发而不推广是没办法成功的。
因此,单细胞组学使用单细胞转录组等多组学联合分析,全面体现细胞生命进程的变化。
04单细胞测序
华大基因的联合创始人杨焕明院士来华农作报告时,曾夸张地说“万物皆可测序”。
杨焕明院士曾是人类基因组计划的参与者之一,如今他所创立的华大基因也参与到了HCA计划中。
如今,好像不管是做什么分子实验,都得去测个转录组,测个代谢组,试图变着花样验证一下自己的结论。
涉及到测序,这可得提到目前的热门话题——单细胞测序。
单细胞测序技术是指在单个细胞水平上,对基因组、转录组、表观组等进行高通量测序分析的一项新技术。它能够揭示单个细胞的基因结构和基因表达状态,反映细胞间的异质性,在肿瘤学、发育生物学、免疫学、神经科学等领域发挥着重要作用。
05单细胞RNA-Seq(scRNA-seq)
单细胞RNA-seq顾名思义就是单个细胞进行转录组测序,那么什么是RNA-seq呢?
细胞无时无刻都在发生反应,假如我们现在有一台照相机,能够定格记录下在某一时刻细胞的照片,当我们记录足够多的照片时,我们就能将各个帧连起来,形成视频,通过电脑播放出来,这就能知道细胞做了啥。
RNA-seq扮演的就是照相机的角色,我们测定不同时刻细胞的转录本,就有可能弄清复杂的细胞事件和不同生物学过程所需的时间。
单细胞RNA测序技术允许在单细胞分辨率下解析基因表达。
单细胞RNA-seq技术和数据分析简介https://www.jianshu.com/p/85e2e38df673
06总结
短期内,受单细胞组学影响最大的可能是肿瘤。
在恶性细胞中,单细胞组学技术可以鉴定出不同的细胞状态,如癌症干细胞、耐药状态、增殖和静止细胞等,并且可以在个体患者中轻易地鉴定出单独的亚克隆,这将对肿瘤的治疗起到巨大作用。
反观单细胞组学的发展
组学的发展现状有"君临天下"的态势,其应用前景是辉煌灿烂的。但需要认识到的是,它的实质也就是一种科研工具,并不能包打天下!作为一个从事或即将从事组学研究的实验室应该头脑清醒,把握好趋势,寻找好自己的位置和发展契机。
——贾伟 (上海交通大学系统生物医学研究院教授)《组学的未来》
尽管目前已经开发了大量的scRNA-seq protocol,但没有protocol是完美的。能肯定的是,单细胞组学一定会在生物科研史上留下浓墨重彩的一笔。
以上只是我了解到的单细胞技术的一些皮毛,写在这里。其实单细胞技术远远不止这些,想要入门一项技术也不是说说而已,想要深入学习的话可以去翻生信技能树曾健明老师的免费课程。