q-PCR流程图
逆转录完后 补加80μL 去离子水 → 20+80=100μL
【备注】若细胞量很少，RNA浓度<150不适用上述 计算工具，可全部加入
【补充】
组织提RNA：
预冷匀浆机底座（-20℃）
① EP管，组织块（20~50mg左右，不要太大，RNA浓度过大最后还是要稀释），1mL Trizol
② 2颗珠子，频率60Hz，1min（没完全匀浆继续加）
③ 吸出液相到新EP管，冰上静置5min，回收珠子
④ 其余同上图后续（+ 200 μL氯仿抽提......）
上机
每个孔：
Sybr 10μL
前后引物 0.8 + 0.8μL
ddH2O 6.8μL
cDNA 1.6μL
总计 20μL
【若孔较多，可先在EP管配n+2~3孔反应体系，最后上cDNA】
