1、把要上传的数据整理在一个文件夹里。

2、用NCBI账号或ORCiD、Microsoft、Google账号登陆，选择Submit，向下滚动，找到Sequence Read Archive (SRA)工具，点击Submit。

向下滚动，找到Sequence Read Archive (SRA)工具，点击Submit。

3、新建提交，填写相关信息。

①Submitter：打星号的是必填信息。两个邮箱不能都是163邮箱或QQ邮箱。填好后点Continue。后面的步骤也是填好后点Continue。

Submitter

②General Information：第一次提交都选NO；一般释放时间都延迟到论文发表后，不提前释放。

General Information

③Project Info：填写项目名称、介绍、基金等信息。“* Is your project part of an umbrella project which is already registered with NCBI?” 一般也选择No。

Project Info

④Sample Type：选择样本类型，植物、动物、菌等。

Sample Type

⑤Biosample Attributes: 最好在线填写，可检查填写信息是否正确，也可下载后填写再上传。

Biosample Attributes

Biosample Attributes信息下载表格填写，标绿色的为必填信息。*organism要填写物种的物种拉丁文名称（双名命名法）。填写好上传点击Continue后会检查填写格式是否正确，如果有报错或警告，根据提示更改报错和警告信息。

Biosample Attributes信息下载表格填写

为了避免上传样本信息的差异性，可在表格的最后一列添加tmpl列，用数字连续编号区分，就可以避免重复了。

样本信息表格最后一列添加tmpl列

⑥SRA Metadata：最好在线填写，可检查填写信息是否正确，也可下载后填写再上传。

SRA Metadata：最好在线填写，可检查填写信息是否正确，也可下载后填写再上传。

SRA Metadata填写时注意：sample_name和样本信息表格的sample_name名字一致；双端测序的filename有两个文件，就填写测序原始数据的两个文件名，填写时要把文件的后缀名带上，比如XX.fq.gz。填完后，点Continue进行下一步上传数据。

SRA Metadata填写注意事项

⑦上传数据（关键步骤）

step1：原始数据很大时，在Files选择“FTP or Aspera Command Line file preload”上传。

Files选择“FTP or Aspera Command Line file preload”

然后下载安装IBM Aspera Connect，下载网址：https://www.ibm.com/products/aspera/downloads#cds。下载适合的版本，按普通软件的安装方式安装。

红色箭头方向标注IBM Aspera Connect下载步骤

step2：记录下AsperaConnect安装好的位置，一般在bin文件里，我的在

C:\Program Files\IBM\Aspera Connect\bin

AsperaConnect安装位置

step3：再在Aspera command line instructions里下载key file，点击即可下载。

Aspera command line instructions里key file位置

step4：key file 下载后显示的名字为aspera.openssh，记录其存储位置，并把aspera.openssh 粘贴到存储位置后面。

D:\aspera.openssh

key file 的存储位置

step5：把要上传的数据都整理在一个文件夹里，记好数据存储位置

可选中其中一个数据查看文件属性即可知道位置信息

我的数据存储位置  F:\2022DLGBS\GKX220316-810 

数据存储位置

step5：用“命令提示符”上传数据

根据NCBI里File下的提示，用命令上传数据。

NCBI里File下的命令提示

快捷键“windows+R ”，搜索打开cmd命令行窗口后输入

cd C:\Program Files\IBM\Aspera Connect\bin #先进入IBM Aspera Connect安装位置

C:\Program Files\IBM\Aspera Connect\bin>ascp -i D:\aspera.openssh -QT -l100m -k1 -d F:\2022DLGBS\GKX220316-810 subasp@upload.ncbi.nlm.nih.gov:uploads/****** # 进入IBM Aspera Connect安装位置后调用Keyfile用命令上传数据到NCBI

通过命令提示符上传数据

传输过程中遇到的问题①：如果传输中断，提示“19 [Peer aborted session]

Partial Completion: 170022323K bytes transferred in 15423 seconds

(90302K bits/sec), in 161 files, 1 directory; 41 files failed.

Session Stop  (Error: Disk write failed (server))”，可再次通过输入以上代码重启上传。

传输中断后重新上传

传输过程中遇到的问题②：Session Stop (Error: Session data transfer timeout (server))，IBM Aspera Connect---Specific transfer failures里给出的解释是可能网络中断，重新连网或者换一个网络，再重新上传即可。

IBM Aspera Connect---Specific transfer failures

传输过程如果有其它问题：可以参考IBM Aspera Connect官网的Transfer issues，网址 https://www.ibm.com/docs/en/aspera-on-cloud?topic=support-transfer-issues。

IBM Aspera Connect---Transfer issues

step6：传完后，选择自己要提交的文件夹，然后点Continue。（只能选择一个文件夹提交，所以在上传前把要上传的数据都要整理在一个文件夹下再上传。传完数据后，要检查上传数据的完整性，包括GB数、Files数、Size。）

上传完后，选择提交相应的数据。

⑧最后，生成上传数据的各项信息，检查各项信息是否正确，如果都没问题就可以点击Submit提交了。

生成上传数据的各项信息，检查后提交。

提交成功后会生成相应的NCBI登录号PRJNA******，看到数据相关的上传信息，并收到提交成功的邮件。

提交成功