【其它】SRA转fastq的那些事

因为我自己以前下载数据主要是从NCBI下载的SRA格式的数据,而SRA文件的解压主要是用sratools中的fastq,但是这个软件不能多线程运行,随着测序数据越来越大,fastq的解压速度可能成为整个流程的瓶颈,每次一个数据的解压过程都需要好几个小时,实在是不能忍受。

fastq-dump SRR20**.sra --gzip --split-3  -O ./ 

我以前常用于转换的命令。

其中

--split-3:首先它是分割的意思,-3实际上指的是分成3个文件。如果结果发现只有一个文件,说明数据不是双端(第三个文件太大会覆盖前两个);如果结果有两个文件,说明是双端文件并且数据质量比较高(没有低质量的reads或者长度小于20bp的reads);如果结果有三个文件,说明是双端文件,但是有的数据质量不高,存在trim的结果,第三个文件的名字一般是:<srr_id>.fastq,而且文件也不大,基本可以忽略。

前面处理单细胞的sra数据的时候,也符合我的预期出来了2个或者3个文件。这三个文件的解释基本就是常规单细胞数据的3个输入文件。

但是我最近处理一批新的单细胞数据的时候,发现转换出来的fastq文件只有一个,就去搜了一下问题。好像也有很多人碰到了这个问题,也推荐最新可以多线程分析的新的升级版tool,就是sratools中的另一个软件fasterq,看名字就知道这个应该更快!

可以看出多了个-e参数来设置多线程的个数,经过测试发现确实速度提升了不少。但是fasterq-dump的优点是快,问题是不能重命名及压缩。

fasterq-dump -O ./ --split-files -e 40  ***.sra

另外对于10X的单细胞测序数据,虽然速度极快,但是fasterq-dump没有把SRR分为-1,-2,-3三个部分,这可能会影响CellRanger的后续分析。

经过测试和查看网上的帖子,发现对于10x的SRR需要加--include-technical参数,原文说到:

SRR9169172 has 3 fragments per spot. theyare labeled as this: technical - biological - technical you can see this yourself if you run: “vdb-dump SRR9169172 -R1 -C READ_TYPE”; fasterq-dump ignores by default the technicalreads.  you can force the technical readsto be written out by “fasterq-dump SRR9169172 --include-technical”;

所以我们需要把命令格式改为:

fasterq-dump -O ./ --split-files -e 40 SRR17555533.sra --include-technical

这样才能正确运行获得想要的3个文件,方面做为下游cellranger的输入。

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