免疫荧光
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PS图片处理：
- 将图片拖入ps软件
- “command +M”调用"curve"功能，调节图片曝光程度
- 然后根据图片的尺寸大小建立一个相同大小的画布，300 像素/英寸的清晰度；黑色背景。
- 首先，在右下角把图层选项中“正常”改为“滤色”，然后将两组dapi和染色图层一同选上，右键进行“图层合并-merge”
- 将图片的透明度调节至50%左右，并可以根据具体情况进行调节。
- 然后根据之前选择好的curve参数调节两组图片。
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谷歌图片处理：
- 设置参数-谷歌-20211029
| target | Black | white |
|---|---|---|
| DAPI | 5 | 200 |
| VPS13C | 20 | 253 |
| GSTP1 | 5 | 180 |
- Image J 批量处理荧光强度处理：
平均荧光强度的定义：对于一张单通道（单色）的荧光图片，每个像素的灰度值代表了该点的荧光强度大小，特定区域的荧光强度公式：平均荧光强度(Mean) = 该区域荧光强度总和(IntDen) / 该区域面积(Area)；Mean: Mean gray value； IntDen: Integrated Density
平均荧光强度并不等于免疫组化中的光密度（Optical Density），所以不需要Invert以及Calibration。单位可以用Arbitrary Units（AU）
- 设置录制：打开图片 --- Plugins --- Macros --- Record --- name it
- 格式转化：Image --- Type --- 8-bit（为灰度图片）
- 调节阈值：Image --- Adjust --- Threshold --- dark ground（自己调节/“Auto”）--- Apply
- 设定需要测量的参数（Analyze-Set Measurements）(area;mean gray value;limit to threshold; integrated density; area fraction)
- 检测（Analyze-Measure）
- 保存数据：file --- save as
- 设置“录制”好的代码：Process --- batch --- macro --- 选择导入文件夹+导出文件夹 --- 粘贴代码 --- process
