WB
Image lab一般是配套分析使用bio rad机器曝光的图片(SCN格式的图片)
UVP有自己的分析软件,也可以进行灰度值计算,但是该软件没有mac版本
Image J可以处理灰度值也可以将条带拉直处理
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PS处理:
- 新建:A4纸
- 将要处理的WB图片直接拖入进入“ps”
- 选择“矩形工具”,根据条带大小框选合适大小(选择固定大小)
- 然后框选合适大小后---选择“选择工具”,将裁剪的部分复制(control+C)到新的A4文件中。(若不能有效复制,则注意是否没有选中图层)
- 选择“编辑”-“描边”-“3-4像素”大小即可
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image J处理:
- 设置参数:设置定量参数。Analyze→Set Measurements。在弹出的对话框中勾选Area、Mean gray value、Min & max gray value、Integrated density。
- 设置单位。Analyze→Set Scale。在弹出的对话框“Unit of length”后面填上“pixels”,其他的不用改动。
- 打开图片:file-open
- 转换格式:image-type-8-bit
- 清除背景:“process” --- "subtract background" --- "Rolling ball radius"为50,并勾上Light background,点击OK即可。
- 翻转:“edit” --- "invert"
- 框选目标区域:选择矩形选框工具框选出需要分析的所有条带。
- 点击菜单栏Analyze下拉出现的measurement,即可弹出你选定区域的灰度统计值,然后手动选择下一个。
- Result-file-save as/也可以复制量化数据到excel表中。
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GraphPad:
- 新建“column”
- 输入数值点击“data”,选择样式,点击“mean with SEM”