【案例经过】
很多医生都认为直接胆红素=结合胆红素。甚至一些检验科的同仁也认为如此。有时我们上班会接到临床医生询问胆红素测定准不准确的电话。首先,我先讲一个插曲,一天笔者正在窗口发化验单,常来的李大爷又挤进来了。小伙子咨询个事:我的胆红素测的是不是有问题呀?你给我看看。对这个大爷我们还是比较熟悉的,因为他是肝病,脸刚来的时候蜡黄蜡黄的,来的次数多了,又比较和蔼、幽默,所以我们对他印象都比较深刻,俗话说:久病成医。这样的病人对一些化验项目已经了解的很深入了,所以笔者不敢怠慢,拿过化验单仔细查看:上面显示总胆红素300.8umol/L,结合胆红素为101.8umol/L,非结合胆红素165.3umol/L。大爷怎么了,这个结果?“那你再看看这个”,另一张化验单显示总胆红素355.5umol/L,直接胆红素188.5umol/L。大爷接着说“大夫说直接胆红素就是结合胆红素,间接胆红素就是非结合胆红素,每次我都是测的常规肝功,今天着急回家就在急诊测了肝功(我科常规生化为湿化学,急诊为干化学),可没有直接胆红素,只有结合与非结合胆红素,为啥这俩没几天差这么多呢?结合与非结合加起来也不等于总胆红素呀?”笔者笑着解释“这是由于检测方法不同带来的原因,放心吧大爷,这个结果没问题,还有另一种胆红素对你的病情影响不大,所以他没说(没准大夫也不知道)。”又是一阵耐心的沟通,才把大爷打发走了。为什么很多医生都会认为直接胆红素等于结合胆红素呢?笔者回来查询了一番。
【研究探索】
百度一下,在百度百科里赫然写着直接胆红素又称结合胆红素,几乎网上其他的解答也都如此,难怪很多医生和患者都这么认为。下面我们就说说胆红素,平时工作中我们会听到很多种胆红素例如:直接胆红素、间接胆红素、结合胆红素、非结合胆红素、δ胆红素等等。这些胆红素之间到底有什么关系?我们先从检测胆红素的方法入手,其方法大致包括:湿化学法(重氮反应法、氧化酶法、化学氧化法),干化学法(美国强生)、其他(HPLC、分光光度法等)。目前比较常用的是重氮反应法和干化学法,这些名字的来历和这些检测方法不无关系,我们再重温一下这些胆红素的简单定义。
直接胆红素:在检测中可以与重氮磺胺酸直接反应的胆红素。
间接胆红素:需要加入加速剂(苯丙酸钠、甲醇、安息香酸钠)等破坏其氢键再与重氮磺胺酸反应的胆红素。
结合胆红素:是指胆红素经肝脏极性转化后与葡萄糖醛酸结合的水溶性胆红素(Bc)。Bc又分为单葡萄糖醛酸结合胆红素(mBc)和双葡萄糖醛酸结合胆红素(dBc)。
非结合胆红素(Bu):是以白蛋白为载体的脂溶性游离胆红素。
δ胆红素(DELB):其是Kuenzle在1966年利用层析方法发现的。δ胆红素是一种与白蛋白以酰胺键共价结合不可分解的胆红素,它具有良好的稳定性,半衰期在17-23天。那δ胆红素属于直接胆红素还是间接胆红素呢?答案是直接胆红素,因为大部分的δ胆红素可溶于水,也会参加与重氮磺胺酸的直接反应。
我们知道直接胆红素在理论上泛指那些可以溶于水的胆红素,但是少量的游离胆红素也可以参加直接反应,因为在(含有乙醇、咖啡因)等因素的环境下,少量的游离胆红素的氢键被破坏也会参加重氮反应。所以最后我们得出结论:
重氮反应中:直接胆红素=结合胆红素(Bc)+大部分δ胆红素(DELB)+少量非结合胆红素(Bu)
结合胆红素(Bc)=mBc+dBc
间接胆红素=非结合胆红素。
这个结论就解决了很多大夫有时会质疑胆红素检测准确性的问题:为什么阻塞性黄疸患者的症状明显改善(酶下降、尿胆红素阴性),但是结合胆红素的比例却越来越高?这是因为他们把结合胆红素和直接胆红素混淆,认为直胆的占比提高就是结合胆红素占比的提高,而实际上是δ胆红素占比的提高(因为它的半衰期长比其他胆红素半衰期长),δ胆红素的提高带动直胆占比的提高,结合胆红素的占比实际上是下降的。