§提取植物基因组

时间段:

9:01-12:24,13:02-17:32

坐标位置:

中国泰安,山东农业大学本部国重楼417室


任务:提取植物基因组(拟南芥和水稻)

实际操作步骤:

A.拟南芥

研磨(2毫升离心管+新鲜拟南芥叶片+钢珠+700微升CTAB,高通量植物组织研磨器50Hz研磨两次)→65℃水浴加热10min(提前打开水浴锅,摇晃/5min)→等体积(700微升)氯仿/异戊醇(24:1),摇晃200下,离心,分3层→取上清xxx微升(1.5微升离心管+2倍等体积无水乙醇)→-20℃冷冻沉淀→离心→弃上清,75%无水乙醇洗涤→弃上清,瞬离→移液枪吸除多余液体→干燥→+水→-20℃冷冻

B.水稻

研磨(1.5毫升离心管+适量水稻叶片+200微升CTAB,研钵研磨)→65℃水浴加热30min(提前打开水浴锅,摇晃/5min)→离心(12000rpm,10min)→取上清液100微升(+3倍等体积无水乙醇,即300微升)→离心→倒掉上清液→瞬离→移液枪吸除多余液体→干燥→+水→-20℃冷冻

标准步骤

毕设第一天的分子生物学基本操作。

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