蜘蛛侠主要反派
犀牛人：阿列克谢·米哈伊洛维奇·西斯艾维奇，一名移民美国的俄罗斯人，由于找不到工作，从而充当黑帮打手，被美国东海岸的西欧黑帮利用金钱诱惑，参加了一项利用辐射线和基因改造将一层强硬的聚合物依附人体皮肤的实验 化身疯狂的犀牛人。
具有可以承受任何高温严寒，全身刀枪不入。邪恶六人组成员。
惊悚：本名赫尔曼·舒尔茨，是一名电气工程师，同时是一名出色的开锁专家。利用职业多次犯案，被捕入狱后，利用自己的专业知识，制作了一套能形成震荡冲击波的手套，化身惊悚。邪恶六人组成员。
猎人克莱文：本名谢尔盖·克拉维诺夫，是世界上最出色的猎人，也是变身龙的同父异母的哥哥，不同于其他猎人使用枪支或弓箭，克莱文更擅长设计陷阱和诱饵削弱对手实力，最后亲手制服。邪恶六人组成员。
变色龙：本名德米特里·斯尼尔加科夫，俄罗斯间谍猎人克莱文同父异母的弟弟。血液天生具有可塑性，这使他能容易的改变自身容貌。加上利用高科技技术和装备伪装自己，擅长模仿对方的言行。真面目从未出现过。
金并：夜魔侠的头号死敌，同样是蜘蛛侠的对手。名为威尔逊·格兰特·菲斯克，是纽约即美国最大的黑社会头目，思维缜密，具有高智慧，全身百分之九十以上是肌肉，力量惊人，具有人类战斗力的最高水平。
底片先生：原是一名蛇头帮组织成员，被暗算后成为综合药物的实验对象。大难不死后获得超能力，身体产生了一个疯狂人格。后来他编造了自己的人份，自称偷渡客马丁·李，成为了美国公民。明面上是金融帝国的掌权人，背地里是纽约最大的黑帮“恶魔帮”的头目“底片先生”。
锤头：名为约瑟夫·哈罗，一位移民美国的俄罗斯人，同样也是纽约最大黑帮的头目之一。因黑帮火并，头部受伤被换上了铁制头骨，让他成为了黑道中神一般的存在。他所领导的黑帮Maggia帮的头目，与底片先生的恶魔帮为不共戴天的死敌。
