背景：
1）多基因表达载体构建已经成为多基因转化策略的关键技术。将多个基因构建在同一载体上，构建融合基因表达载体转化植物节省人力物力，提高效率，减少多次转化后代分离和重组问题。用连接肽构建融合基因转化可以是多个基因的表达同步切表达水平相当，对基因可控性高。与连锁基因转化相比，减少启动子数量，降低基因沉默几率，为复合性状转基因植物获得提供新思路。常用包括2A序列，LP4序列，IRES序列，NIa序列。
2A：在植物中常用的2A序列是 来源于口蹄疫病毒的一段多肽(de Felipe et al. 2006; Ryan et al. 1991)。 实验结果显示：当2A上游蛋白没有信号肽时，下游带有信号 肽的蛋白可以正确的定位；当2A上游蛋白含有共翻译的信号肽时，下游不带信号肽的蛋白 及带有翻译后信号肽的蛋白定位在内质网，带有共翻译信号肽的蛋白定位在线粒体中(de Felipe 2004)。
LP4是来源于凤仙花(Impatiens balsamina L.)种子中表达的一段多肽。凤仙花种子LP4是由十六个氨基酸组成的一段多肽（SNAADEVATPEDVEPG），该多肽的剪切发生在翻译水平，由内源的蛋白酶识别并剪切。剪切位点在植物体内，留下较少的位点，对成熟肽影响小。
LP4/2A序列即LP4与2A的杂合序列，即将LP4的前九个氨基酸和2A融合起来作为连接肽。对成熟肽的功能影响小，踢出2A留下的多余的氨基酸序列。
2）PIM（phosphomannose isomerase）自然界广泛存在，植物界大多无编码基因，作为正向筛选体系，表型是生长抑制和不抑制。
结果：
1）植物表达载体构建：前三个看不同连接肽的剪切效率；第三第四看基因前后位置对连接肽剪切效率影响
2）连接肽的剪切效率各不相同，LP4/2A的剪切效率最强，在80%-100%之间。2A的剪切效率在50%-60%之间， LP4的剪切效率最低，在20%-30%之间
3）转基因玉米的构建
4）商业化的2Am1和2Am2
总结：中文果然还是yyds，简单明了，两篇文献就略懂一个东西；需要加把劲把复杂的搞懂。
