Morpholino

Morpholino 原理

-Morpholino(MO)全称Morpholino Anti-sense oligos,是由美国Gene Tools公司研发的第三代反义寡核苷酸。
-Morpholino是把核苷酸上的五碳糖环用一个吗啉环(morpholino)取代,同时对原有的磷酸基团也做了改变。使得这样一个DNA分子类似物可以通过碱基配对的方式同RNA和DNA单链结合,但是由于结构的改变,使得整个分子不带有任何电荷,因此无法被任何酶识别(包括DNase和RNase),使得这类物质在细胞内有着极强的稳定性。


Morpholino 作用

-Morpholino一般包含25个碱基,也是基于反义技术与目标mRNA结合。通过与不同阶段的mRNA结合,阻断目标基因的表达,包括mRNA剪切阶段(Splicing)和翻译阶段(ATG)。

剪切阶段(Splicing)-- 结合在pre-mRNA中外显子和内含子连接区域,通过阻断mRNA剪切来降低目的基因表达的splice MO

阻断方式:空间位阻
结合对象:Pre-mRNA
机理:干扰Pre-mRNA的剪切,导致生成的mRNA缺失目标外显子
阻断的靶区域:Pre-mRNA的“外显子+内含子”交界处

翻译阶段(ATG)-- 结合在mRNA的ORF前端(起始密码子附近)阻止翻译的ATG MO

阻断方式:空间位阻
结合对象:成熟mRNA
机理:阻断核糖体前体(Initiation Complex)的组装
阻断的靶区域:AUG(起始密码子)开始的25个碱基以及5’UTR

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