吴聊大鼠:BA对旷场实验、高架十字迷宫中的焦虑小鼠影响

吴聊大鼠,大家好,我是吴文远。

有研究发现,酸枣仁的有效成分之一白桦脂酸(betulinic acid,BA)具有很好的抗脑缺血再灌注氧化应激损伤作用,本文拟通过小鼠焦虑模型的旷场自发活动、高架十字迷宫行为学实验评价BA的抗焦虑作用。

1材料与方法

1.1材料与仪器

BA纯度≥98%;旷场自发活动实验(XR-XZ301,上海欣软信息科技有限公司);高架十字迷宫实验(XR-XG201,上海欣软信息科技有限公司)。

1.2实验动物及分组

健康雄性ICR小鼠24只,体质量22~28g,并在实验前适应1周。将所有小鼠随机分为三组,每组8只,对照组、焦虑模型组、BA组。

1.3实验方法

1.3.1旷场自发活动实验

将小鼠放入行为学实验室适应环境1h。对照组给予皮下注射生理盐水,焦虑模型组和BA组给予皮下注射mCPP,各组注射30min后,将小鼠放入观察箱内(40cm×40cm×35cm),通过大小鼠通用型自发活动观察系统将开场分为中央区与周围区,并连续采集小鼠5min内的运动数据,以活动总路程、中央时间百分比和中央路程百分比评价小鼠自发活动的特点。每只小鼠实验结束后,清除粪便及尿液,并用75%乙醇擦洗观察箱,消除异味对其他小鼠的影响。


旷场实验 型号XR-XZ301 上海欣软

1.3.2高架十字迷宫实验

在小鼠完成旷场自发活动实验后,立即进行高架十字迷宫实验,在安静环境下将小鼠放入迷宫中央区且面朝开臂,通过摄像监视器垂直监视并用小鼠用高架十字迷宫视频分析系统记录小鼠5min内的运动数据,分别以活动总路程、开臂进入次数百分比和开臂内停留时间百分比作为评价指标。每只小鼠实验结束后,清除粪便及尿液,用75%乙醇擦拭高架十字迷宫,消除异味对其他小鼠的影响。


高架十字迷宫 型号XR-XG201 上海欣软

1.4统计学处理

用Graph Pad Prism5.0统计软件,计量资料以x±s表示,采用One-way ANOVA和Newman Keuls法进行显著性检验。P<0.05差异表示有统计学意义。

2结果

2.1 BA对焦虑小鼠旷场自发活动的作用

对照组、焦虑模型组及BA预处理组在旷场自发活动运动总路程之间比较,差异无统计学意义(P>0.05);与对照组相比,焦虑模型组小鼠中央区路程百分比和中央区时间百分比均下降,而相比焦虑模型组,BA预处理组的中央路程百分比和中央时间百分比均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。


表 1 BA对焦虑小鼠自发活动的作用 (xˉ ± s)

2.2 BA对焦虑小鼠高架十字迷宫实验的影响

对照组、焦虑组和BA组高架十字迷宫内活动总路程比较,差异无统计学意义(P>0.05);与对照组相比,焦虑组小鼠开臂进入次数百分比以及开臂内停留时间百分比均降低,差异有统计学意义(P<0.05),与焦虑组小鼠比较,BA组小鼠开臂进入次数百分比和开臂内停留时间百分比均增加,差异有统计学意义(P<0.05),BA组与对照组相比,开臂进入次数百分比以及开臂内停留时间百分比差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。


表 2 BA对焦虑小鼠高架十字迷宫的作用 (xˉ ± s)

3讨论

旷场自发活动实验和高架十字迷宫实验目前被广泛应用于小鼠焦虑程度的行为学评估,其原理均是根据啮齿类动物的天性来设计,即:对新异环境易产生恐惧但又喜于探究。在旷场自发活动实验中,总运动路程反映小鼠的活动状态,中央区时间百分比与中央区路程百分比反映小鼠的焦虑程度,焦虑程度高的小鼠喜停留在周边区域,而对中央区域的探究次数越多、在中央区域的停留时间越长,则提示着焦虑水平越低。在高架十字迷宫实验中,进入开臂次数的百分比以及在开臂内停留时间百分比越低则提示焦虑水平越高。本研究结果发现,给予BA预处理的焦虑小鼠在旷场自发活动中的中央区时间百分比以及中央区路程百分比均较焦虑模型组升高,在高架十字迷宫实验中BA预处理也增加了小鼠开臂进入次数百分比和开臂停留时间百分比,这些行为学实验结果提示了BA预处理具有一定的减轻小鼠焦虑样行为的作用。

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