吴聊大鼠:LBP对衰老型小鼠行为的影响|跳台实验

吴聊大鼠,大家好,我是吴文远。

研究表明,LBP(Lyciumbarbarumpolysaccharide,LBP)发现LBP对染铅小鼠和锰中毒小鼠脑功能有改善作用,能提高脑功能损伤小鼠的空间学习和记忆能力。铅、锰中毒引起的脑损伤是病理性过程,而衰老是随着年龄的增长,生物体在形态结构和生理功能方面出现的一系列退行性改变。与病理性损伤不同,衰老所致的脑功能退化是一个自然、生理过程。因此,本文将研究LBP是否对衰老导致的学习认知能力减退有改善作用。

1实验材料

1.1实验动物与药剂、仪器

SPF级昆明小鼠,雌雄各半,体重18~22g。纯度80.5%的LBP浓缩提取液。跳台箱材质采用无味的ABS塑料材质或者医用有机板,颜色为黑色或者灰色。上海欣软信息科技有限公司生产的跳台箱包括一个30cm*30cm,底部可通电的实验箱、一个直径为5cm/10cm 的平台以及SuperSdt跳台视频分析软件(型号:XR-3TB),通常平台高度与直径一样,尺寸可定制。实验箱上方安装录像监控器(视频盒),以录制动物在实验箱中的活动情况,以供日后分析使用。

1.2实验设计

实验设计正常对照组、模型组、维生素E组、LBP各组(100、200、300mg/kg)。除正常对照组(由正常小鼠组成)外,其余各组小鼠每天颈部皮下注射D-半乳糖溶液(100mg/kg)建立模型组。造模期间,小鼠灌胃给予维生素E(200mg/kg)组成维生素E组、分别灌胃给予不同剂量的LBP(100、200、300mg/kg)组成LBP各组。8周后执行旷场、强迫游泳和跳台实验,测试小鼠的运动、空间探索、学习和记忆能力。

2实验方法

2.1旷场实验

实验开始前所有小鼠均提前适应环境,实验小鼠每只测试1次。将小鼠放入实验箱的中心位置,在箱中自由探索环境5min。记录5min内小鼠的运动时间、运动速度和后肢直立次数(包括攀附箱壁和两支前爪腾空次数)。

旷场实验仪器 型号XR-XZ301 上海欣软

2.2强迫游泳实验

实验前所有小鼠均提前适应环境。将实验小鼠提尾置于实验箱的中心位置正上方,随后松手使小鼠自由落体入水,随即开始让小鼠在水中游泳。

强迫游泳实验仪器 型号XR-XQ202 上海欣软

2.3跳台实验

小鼠跳台四间反应箱规格为25cm×25cm×30cm,箱底是通36V连续电刺激的铜栅。每间中间放置一直径12cm、高4.5cm的橡皮垫,作为小鼠回避电击的安全区。小鼠实验前先适应环境3min,然后底部铜栅通以36V交流电。记录小鼠受到电刺激后跳上橡皮垫的反应时间以及5min内的错误次数(受到电击的次数)。24h后将小鼠再次置于跳台仪中适应3min,将其置于橡皮垫上,记录第1次跳上橡皮垫的潜伏期,作为记忆成绩。

3实验结果

3.1旷场实验

如表1所示,与正常对照组相比,衰老模型组小鼠运动时间、运动速度和后肢直立的次数均显著下降(P<0.01)。经不同剂量LBP和维生素E治疗后,与模型组小鼠比较,LBP组和维生素E组小鼠运动时间、运动速度和站立次数均明显增加(P<0.01,P<0.05),LBP组和维生素E组差异无统计学意义(P>0.05),LBP组和与正常对照组相比也无统计学差异(P>0.05)。

表1 各组小鼠5 min内的旷场试验结果(xˉ± s ,n=8)

3.2强迫游泳实验

每只小鼠在5min内的游泳时间如表2所示,模型组与正常对照组小鼠相比,5min内的游泳时间显著降低(P<0.01)。LBP治疗各组及维生素E组与模型组小鼠比较,小鼠的游泳时间均明显延长(P<0.05,P<0.01),而LBP组与正常对照组相比无显著性差异(P>0.05)。

表2 各组小鼠5 min内的游泳时间结果(xˉ± s ,n=8)

3.3跳台实验

跳台实验常用来测试小鼠被动学习记忆能力。2次跳台实验结果如表3所示,第1次测试,各组小鼠的上台潜伏期没有明显差异(P>0.05)。但在第2次记忆重现测试中,模型组小鼠的上台潜伏期明显比正常组小鼠延长。经LBP治疗后,各治疗组小鼠的上台潜伏期均缩短,与模型组小鼠比较有显著性差异(P<0.05,P<0.01),中剂量和高剂量LBP组与正常对照组相比也无统计学差异(P>0.05)

表3 各组小鼠2次上台的潜伏期结果(xˉ± s ,n=8)

4讨论

本研究结果证实LBP能提高提高衰老小鼠的运动能力、空间 探索、学习和记忆能力,使衰老小鼠活力增加。

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