T细胞杀死被病毒感染的细胞和癌细胞。
B细胞,针对细菌或病毒,生产名为抗体的作战武器。
DC细胞,吞噬细菌等抗原、激活T细胞免疫应答。
NK细胞,击杀癌细胞,抗病毒感染和免疫调节;注射IL-2/IL-15可以诱导NK细胞在体内扩增。
M2巨噬细胞通过调节机制来抑制慢性炎症反应。
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单核细胞的固有标志物是CD14,巨噬细胞的标志物:人的CD80、小鼠的F4/80等。巨噬细胞主要可分为经典活化的M1型巨噬细胞(促炎)和选择性活化的M2 型巨噬细胞(抗炎)。
BMDCs,从小鼠Femurs(大腿骨)and Tibias(胫骨)抽取, cultured with GM-CSF and IL4 (Peprotech, 315-03, 214-14, 20 ng/ml) or with FLT3L (Peprotech, 250-31L, 100 ng/ml),培养7天后可以使用。
CD8+ OT-I T cells were isolated from the spleen and lymph nodes of 8-week-old OT-I mice using MagniSort™ Mouse CD8 T cell Enrichment Kit (Thermo Fisher, 8804-4622-74).
小鼠由于血液量少,因此,主要从骨髓中分离单核细胞,再诱导成为DC细胞。用10 ml 1640培养基+30% AG8653细胞培养液上清(含GM-CSF等因子)重悬,按大约1x107 cell/dish铺细胞,37℃培养三天;第三天的时候,将培养皿斜靠在一移液管上,静止几分钟,待细胞大部分沉降之后,吸取上清5ml,再补充5ml培养基,继续培养三-四天;(因为DC介于半贴壁,为了保证所有DC状态一致)。
Ag8653 GM-CSF producing tumor cell line: Organism: Mus musculus Tissue: bone marrow
ACK红细胞裂解液
脾脏是机体最大的免疫器官,含有大量的淋巴细胞和巨噬细胞,是机体细胞免疫和体液免疫的中心。
使用C57BL/6雌性小鼠,年龄5-10周,因为与雄性或老年小鼠相比,它们具有较高的初始T细胞百分比和较低的体脂。来自C57BL/6小鼠的细胞更好地产生Th1细胞,而来自Balb.c小鼠的细胞更好地产生Th2细胞。
小鼠脾脏、淋巴结组织初始CD4+T分离以及体外诱导分化为Th1/Th2/iTreg/Th17详细步骤 https://mp.weixin.qq.com/s?src=11×tamp=1657893495&ver=3922&signature=PKrKvpSJi8TM8UEJLU53HFZjgSWLzVhOuOciDFDZcMEcuxdb92U5AYolAdp1BaX6k8hZdoLbOj3DKH5PGvJBfuQrW5XTFGg1uxRETzxnsTY42xRna-e5lTgKmDMNMO&new=1