三代测序技术包括Pacbio和Nanopore。现在越来越多的高分文章,已组装到染色体水平,从而拜托了对遗传图谱的依赖。
基因组的组装,有10X Genomic linked-reads、Bionore光学图谱和Chicago技术(体外Hic技术)。
1.10X Genomic linked-reads:能够得到跨度100kb以上的linked reads的信息,与三代组装相结合。
技术优势:1)低起始量建库,仅1ng基因组即可得到10X Genomic 文库。
2)长跨度信息:可获得100kb以上的跨度信息。
3)基因组组装质量的提升。
代表文章:1)2016年Nature上人的基因组;2)玉米Mo17
2.Bionore光学图谱:通过酶切和芯片技术对长达几百Kb的长链DNA单分子成像,在更短的时间内提供更完整的基因图谱。可应用于基因组辅助组装和SV(结构变异,structural variants)检测等方面。
技术优势:1)超长距离检测:提供大尺度的远程信息。
2) 单分子检测,无任何杂信号干扰,反映最真实的DNA信息。
3)无PCR过程、无片段化操作,保持DNA 最原始最完整的信息。
代表文章:1)2015年Nature Method,人的基因组;2)复活草,2015,Nature;3)2016 Science 大猩猩;4)BioRxiv,2016山羊。
3.Chicago 技术(Hic):基于体外染色质的方法,依据DNA空间结构,得到基因组范围内的远距离序列信息,从而辅助基因组组装。
技术优势:1)依据DNA 空间结构,可以得到基因组范围内的远距离序列信息。
2)体外重组染色体,数据噪音小,成分纯净,组装准确性高
3)操作简单,使用效率高,应用物种广。
代表文章:1)2016Nature Biotechnology 上木薯基因组;2)蝙蝠、慈鲷鱼、鸽子、蝴蝶、黑猩猩、草原鸡、人和鳄鱼等动物学文章;3)马铃薯等植物学文章、
补充:基因组组装三种技术对比分析