实践是检验真理的唯一标准。而实践后再返回来看真理,也许就会有一些新的感触吧。
1. 血清是什么
血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白原及某些凝血因子后,分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。
2. 血清有什么作用
提供基本营养物质,包括激素、维生素、转运蛋白、微量元素、扩散因子和生长因子等细胞增殖和维持的必需成分,促进细胞生长。
3. 血清的分类
(1)来源:常见的血清供体动物,主要有牛、马、猪、兔、鸡等。
(2)年龄:据采血时间不同和血清采制方法分为:又可以分为胎牛、新生牛、小牛血清和成年牛血清:
胎牛血清(Foetal Bovine Serum,简称FBS):5-8月未出生胎牛,人工引产胎牛心脏穿刺取血;【Gibco】
新生牛血清(Newborn Calf Serum,简称NBCS):出生14小时内未进食的新生牛,通常采用颈动脉采集血液分离得到的血清;
小牛血清(Calf Serum):出生后1-12月龄小牛动脉采血分离血清;
成年牛血清(Adult Bovine Serum,简称ABS):一岁以上成年牛,屠宰时收集全血后分离得到血清。
(3)不同牛龄血清所含的促细胞生长因子、促贴附生长因子、激素及其他活性物质等组分与比例不同。常规来说,年龄越小的牛血清,细胞培养效果越好。其中胎牛由于还未接触外界,血液中所含抗体、补体等对细胞生长有害的成分最少,血清的质量最高。根据血清质量从优到次排序依次为,胎牛>新生牛>小牛>成年牛。所以目前多数科研人员选择胎牛血清进行细胞培养。
4. 血清的解冻【这是刷新我的认知,以前比较多会4℃过夜。但没想到我曾用的快速解冻如此接近真相】
以500ml血清为例
第一步:室温90min;第二步:20℃水浴25min;第三步:37℃水浴35min。
5. 培养体系替换血清
70%→50%→30%
6. 血清的质量鉴别:
颜色、澄清度、沉淀