Annexin V-AbFluor 405 细胞凋亡检测试剂盒
Annexin V-AbFluor 405 细胞凋亡检测试剂盒是一种用于检测细胞凋亡的工具，以下是其具体介绍：
检测原理
在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）位于细胞膜内侧，而细胞进入凋亡状态后，PS 会从质膜内叶向外叶运输，暴露在细胞外环境中。Annexin V 是一种 35 - 36kDa 的 Ca²⁺依赖性磷脂结合蛋白，对 PS 具有高度亲和力。该试剂盒中的 Annexin V-AbFluor™ 405 标记有蓝色荧光团，能与凋亡细胞表面的 PS 特异性结合，从而使早期凋亡细胞显示细胞膜蓝色荧光。碘化丙啶（PI）是一种荧光核染料，不能透过活细胞和早期凋亡细胞的完整细胞膜，但可进入细胞膜破损的死细胞，与细胞内的核酸结合，使其呈现红色荧光。因此，通过 Annexin V-AbFluor™ 405 和 PI 双染，可将活细胞、早期凋亡细胞和死细胞区分开来。
试剂盒组成
[if !supportLists]· [endif]Annexin V-AbFluor™ 405：即用型试剂，用于标记凋亡细胞表面的PS，使用前需平衡到室温1。
[if !supportLists]· [endif]Propidium Iodide (PI)：即用型核酸染料，用于区分死细胞和活细胞及早期凋亡细胞，使用前平衡到室温1。
[if !supportLists]· [endif]Annexin V Binding Buffer (5×)：需要用去离子水稀释成1×Annexin V Binding Buffer，为 Annexin V 与 PS 的结合提供适宜的缓冲环境1。
产品特点
[if !supportLists]· [endif]荧光特性良好：AbFluor™ 405 荧光团具有较强的荧光强度和光稳定性，其激发波长为 404nm，发射波长为 431nm，相比其他一些蓝色荧光染料，能提供更清晰、稳定的荧光信号，便于检测和分析3。
[if !supportLists]· [endif]操作简便快捷：提供了标准化的操作流程，细胞染色步骤简单，无需复杂的样品预处理。染色后可直接通过流式细胞仪或荧光显微镜进行分析，节省时间和精力1。
[if !supportLists]· [endif]结果清晰准确：能特异性地识别凋亡细胞，通过Annexin V-AbFluor™ 405 和 PI 的双染，可明确区分活细胞、早期凋亡细胞和死细胞，使实验结果更加清晰准确，有助于对细胞凋亡情况进行精确的定量和定性分析。
[if !supportLists]· [endif]适用范围广：适用于多种细胞类型的凋亡检测，无论是悬浮细胞还是贴壁细胞，均可使用该试剂盒进行检测，并且可应用于流式细胞仪和荧光显微镜等不同的检测设备，满足不同实验条件和需求1。
使用方法
[if !supportLists]· [endif]样本准备：通过适当方法诱导细胞凋亡，同时设置未诱导的对照培养物。对于贴壁细胞，需用胰酶消化后离心收集细胞，但要控制消化时间，避免细胞膜结构损伤出现假阳性；对于悬浮细胞，直接离心收集即可。然后用冰预冷的PBS 洗涤细胞两次。
[if !supportLists]· [endif]试剂准备：用去离子水将Annexin V Binding Buffer (5×) 稀释成 1×Annexin V Binding Buffer。将 Annexin V-AbFluor™ 405 和 PI 平衡到室温。
[if !supportLists]· [endif]加样与反应：用1×Annexin V Binding Buffer 重悬细胞，每 100µL 细胞悬液中加入 4 - 5µL Annexin V-AbFluor™ 405 和 1 - 2µL PI，轻柔混匀，室温避光孵育 15 - 30min。
[if !supportLists]· [endif]检测信号：孵育结束后，若用流式细胞仪分析，需加入400µL 1×Annexin V Binding Buffer，轻柔混匀后置于冰上，在 30min 内进行检测，使用 404nm 和 535nm 激发，在 431nm 和 617nm 附近测量荧光；若用荧光显微镜分析，对于悬浮细胞，将细胞悬浮液滴于玻片上，用盖玻片盖住细胞后进行观察；对于贴壁细胞，用 1×Annexin V Binding Buffer 洗涤细胞两次后，在载玻片上添加一滴 1×Annexin V Binding Buffer，将细胞爬片置于其上，或在细胞腔室载玻片上添加足够的 1×Annexin V Binding Buffer 覆盖细胞，然后使用适当的滤光片进行观察。
应用领域
[if !supportLists]· [endif]细胞凋亡研究：在基础生物学研究中，用于观察和分析细胞在各种生理或病理条件下的凋亡情况，如研究细胞受到药物、辐射、病毒感染等因素影响时的凋亡变化，有助于深入了解细胞凋亡的机制和相关信号通路。
[if !supportLists]· [endif]药物研发：在药物筛选和药效评价中，可作为评估药物对细胞凋亡诱导作用的重要工具。通过检测不同药物处理后细胞的凋亡情况，筛选出具有诱导肿瘤细胞凋亡或抑制正常细胞凋亡等特定作用的药物，为药物研发提供重要的实验依据。
[if !supportLists]· [endif]疾病机制研究：许多疾病的发生和发展与细胞凋亡异常有关，如癌症、神经退行性疾病等。利用该试剂盒可以研究疾病模型中细胞凋亡的变化规律，有助于揭示疾病的发病机制，为疾病的诊断和治疗提供新的靶点和思路。
技术支持
亚科因（武汉）生物技术有限公司
Abbkine亚科因致力于细胞科研检测及细胞治疗领域关键生化检测试剂盒的研发、生产和销售,成为全球细胞制药领域创新的关键推动者。
