PI双染细胞凋亡检测试剂盒

PI（碘化丙啶）双染细胞凋亡检测试剂盒是一种常用于检测细胞凋亡的实验工具，以下从原理、组成、操作步骤、结果分析等方面进行介绍：

检测原理

[if !supportLists]· [endif]细胞膜通透性变化：在细胞凋亡的早期，细胞膜的磷脂酰丝氨酸（PS）会从细胞膜的内侧翻转到外侧。Annexin V 是一种对 PS 具有高度亲和力的蛋白质，它可以与翻转到细胞膜外侧的 PS 特异性结合。在细胞凋亡的晚期和坏死细胞中，细胞膜的通透性会显著增加，PI 可以穿透细胞膜，与细胞内的核酸结合，使细胞发出红色荧光。

[if !supportLists]· [endif]荧光标记：利用Annexin V 结合 PS 以及 PI 染色的特性，通过不同颜色的荧光来区分正常细胞、早期凋亡细胞、晚期凋亡细胞和坏死细胞。通常 Annexin V 会标记上绿色荧光（如 FITC），PI 为红色荧光，在荧光显微镜或流式细胞仪下可以观察到不同荧光信号。

试剂盒组成

[if !supportLists]· [endif]Annexin V-FITC 溶液：用于标记凋亡早期细胞表面外翻的PS。

[if !supportLists]· [endif]PI 溶液：用于标记坏死细胞和晚期凋亡细胞内的核酸。

[if !supportLists]· [endif]结合缓冲液：提供适宜的离子浓度和pH 环境，保证 Annexin V 与 PS 的特异性结合。

[if !supportLists]· [endif]阳性对照试剂：一般为已知的能够诱导细胞凋亡的试剂，用于验证试剂盒的有效性和实验体系的可靠性。

[if !supportLists]· [endif]阴性对照试剂：通常为正常细胞样本或未处理的细胞样本，用于设定荧光检测的基线和区分细胞群体。

操作步骤

[if !supportLists]1. [endif]细胞准备：收集待检测的细胞，用胰酶消化并离心收集细胞沉淀，然后用PBS 洗涤细胞 2 次，以去除培养基中的血清等成分，避免对实验结果产生干扰。

[if !supportLists]2. [endif]染色：将细胞重悬于结合缓冲液中，调整细胞浓度至合适范围。取适量细胞悬液于流式管中，加入Annexin V-FITC 和 PI 溶液，轻轻混匀，室温下避光孵育 15-30 分钟。

[if !supportLists]3. [endif]检测：孵育结束后，加入适量结合缓冲液，在流式细胞仪或荧光显微镜下进行检测。

结果分析

[if !supportLists]· [endif]流式细胞仪检测：在流式细胞仪的散点图上，通常以FITC 为横坐标，PI 为纵坐标。正常细胞表现为 Annexin V-FITC 和 PI 双阴性，位于左下角象限；早期凋亡细胞表现为 Annexin V-FITC 阳性、PI 阴性，位于右下角象限；晚期凋亡细胞和坏死细胞则表现为 Annexin V-FITC 和 PI 双阳性，位于右上角象限。

[if !supportLists]· [endif]荧光显微镜检测：正常细胞无荧光或仅有微弱的背景荧光；早期凋亡细胞呈现绿色荧光；晚期凋亡细胞和坏死细胞则呈现绿色和红色的混合荧光。

应用领域

[if !supportLists]· [endif]肿瘤研究：用于研究肿瘤细胞的凋亡机制，评估肿瘤治疗药物的疗效，了解肿瘤细胞对化疗、放疗等治疗手段的敏感性。

[if !supportLists]· [endif]细胞生物学研究：探究细胞在生理或病理条件下的凋亡过程，如细胞发育、分化、衰老等过程中的凋亡现象。

[if !supportLists]· [endif]药物研发：筛选和评价具有诱导细胞凋亡作用的新型药物，为药物的研发和优化提供实验依据。

PI 双染细胞凋亡检测试剂盒是一种操作简便、结果准确的细胞凋亡检测工具，在生命科学研究的多个领域都发挥着重要作用。但在使用过程中，需要严格按照说明书操作，以确保实验结果的可靠性。

技术支持

亚科因（武汉）生物技术有限公司

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