需要提前准备的东西:
氯仿,异丙醇,75%乙醇,无菌水,65℃水浴锅
- 取玻璃纸上培养2d的炭疽菌菌丝于2mLEP管中,加入3颗钢珠,加入900μLCTAB提取液后用组织研磨仪研磨3min(65HZ,180S);
- 置于65℃水浴锅中水浴1h,每15min颠倒混匀一次;
- 水浴完成后加入等体积的氯仿,振荡混匀后12000rpm离心10min;
- 吸取750μL上清到1.5mLEP管中,加入等体积的异丙醇溶液,混匀后置于-20℃过夜;
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12000rpm离心10min后倒上清,加入500μL75%乙醇洗涤沉淀后,12000rpm离心10min,倒掉上清,晾干后加入30μL无菌水溶解DNA,轻弹管壁数下以确保DNA充分溶解,而后置于-20℃保存。