产品特点
◎采用独特的消化技术，去除较大分子的DNA和rRNA, 使miRNA更容易分离提取；
◎采用miRNA富集技术，使细胞miRNA聚集起来，使之更容易被核酸纯化膜吸附纯化，大幅提升miRNA的提取效率；
◎操作简便，只需30多分钟即可获得理想的miRNA提取结果。
产品介绍
miRNA分子较小，约19-25个碱基，传统的TRIzol及其它常用的RNA提取试剂盒提取的是细胞总RNA，主要是较大分子的rRNA，对miRNA的提取效果显著不佳。百代生物经较长时间的实验摸索，研发成功了可高效提取细胞miRNA的专门试剂盒。BIOG细胞miRNA提取试剂盒采用独特的消化配方，先去除较大分子的DNA和rRNA，再使用miRNA富集技术，使细胞miRNA聚集起来，使之更容易被核酸纯化膜吸附纯化，与部分同类试剂盒相比，显著提升了miRNA的提取效率。BIOG细胞miRNA提取试剂盒各组分经反复优化，操作也非常简便，只需30多分钟即可获得理想的提取结果。
操作步骤
1. 请准备：无水乙醇、PH7.5 PBS溶液、1.5mL RNA-Free离心管。
2. 取出洗涤液，按85%比例加入无水乙醇， 1.5mL加入8.5mL无水乙醇，充分混匀。
3. 细胞处理：取培养细胞悬液，2000rpm离心5分钟，去培养上清，加50ul PH7.5 PBS，充分混匀。
4. 加入150uL BIOG裂解液，20uL BIOG消化液，65度温育10分钟。
5. 加入0.22mL miRNA释放剂 ，充分振荡混匀，室温放置2分钟；
6. 13,000rpm 离心5分钟，将400uL上清液转移到1支新的1.5mL RNA-Free离心管；
7. 加入5uL miRNA富集剂，再加入300 uL无水乙醇，充分混匀，静置2分钟；
8. 将吸附柱放入收集管内，将上述溶液转入吸附柱内，13,000 rpm 离心1 分钟，弃收集管内废液。
9. 将吸附柱放回收集管内，加600μL 洗涤液至吸附柱内，静置2分钟，13,000 rpm 离心1 分钟，弃收集管内废液。
10. 按每份样本30μL 取洗脱液（如10份提取样本，即取300μL 洗脱液），放置于灭菌RNA-Free离心管，65℃预热。
11. 将吸附柱放回收集管内，13,000 rpm 离心2 分钟，离去残留的乙醇。
12. 取出吸附柱，放入新的1.5mL RNA-Free离心管，开盖放置2分钟，挥发乙醇。
13. 加入30 μL 预热的洗脱液，静置2分钟，12,000 rpm 离心1分钟，收集miRNA溶液。
注意事项：
1.裂解液含有刺激性化学物质，操作过程请做好防护措施，避免直接接触皮肤，防止吸入口鼻。
2.由于RNA容易降解，提取实验所用器具应除去RNA酶，实验过程中最好戴一次性洁净手套、口罩，提取的RNA溶液可适当加入RNA保护因子（货号：51090，一般50μLRNA溶液加入2μL。）
3.洗涤液加入乙醇后要充分混匀，最好现用现配，每次根据所要提取的样本量计算后适量配制。
4.所用细胞量建议不高于107，洗涤液在使用前请加入无水乙醇后充分混匀。
