大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)培养要点

NR8383 (正常大鼠,1983年)来源于肺灌洗时的正常大鼠肺泡巨噬细胞。细胞在gerbil肺细胞连续培养液存在下培养了大约8-9个月。随后,不再需要外源生长因子。通过有限稀释法从单个细胞克隆并亚克隆NR8383细胞,并三次用软琼脂亚克隆。细胞表现出巨噬细胞的特性,吞噬酵母多糖和铜绿,非特异性脂酶活性,Fc受体,氧化降解;分泌IL-1, TGF-β和IL-6,可重复地响应外源生长因子。NR8383细胞响应博莱霉素,分泌TGF-β前体。在博莱霉素刺激下,TGF –β mRNA表达也上升。细胞对内毒素敏感。1-10 钠克/毫升的LPS水平抑制增生达50%。即使达到0.001毫克/毫升的水平,LPS抑制还是无毒且在后续过程中可逆的。NR8383细胞株提供了高响应的肺泡巨噬细胞的均一来源,可以用于体外研究巨响细胞相关活性。

细胞名称:大鼠肺泡巨噬细胞

细胞别名:NR-8383; NR 8383; NR8383.1; AgC11x3A; Normal Rat, August 3, 1983

产品货号:TCR-C611

种属来源:大鼠

组织来源:

细胞形态:巨噬细胞样

生长特性:半贴半悬

培养体系:F12K+15%FBS+1%Glutamax+1%P/S

配套培养基货号:TCR-G611

传代比例:1:2-1:4,每2-3天换液一次

传代周期:96-120 h

培养条件:气相:95%空气+5%CO2,温度:37℃

冻存条件:60%基础培养基+30%FBS+10%DMSO,液氮储存

推荐海星HyCyte®一步冻存液(即用型、无血清、无需程序降温),货号:GUCP-R201

质量检测:细菌、真菌、支原体检测均为阴性

NR8383细胞特性

① 大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)为半贴半悬细胞,细胞在低密度时有少量细胞团粘附瓶底,细胞高密度时为全悬浮状态。

② NR8383传代周期较长,在标准培养体系F12K+20%FBS中,倍增时间范围在48-72h,细胞传代比例1:2,传代周期4-5天,中途每2~3天需要进行补液或者换液,维持细胞所需营养。

NR8383细胞培养注意事项

① 细胞复苏后增殖慢需要7天左右,3天后换液一次。细胞应提高密度冻存,建议2-3×10⁶cells/mL。

② NR8383细胞对内毒素敏感。1-10 ng/mL的LPS水平抑制增殖达50%。在细胞培养过程中建议使用内毒素低的试剂及一次性细胞培养耗材。

③ 血清质量差异可能引起倍增时间波动,建议选用高质量的胎牛血清。推荐使用HyCyte®原代细胞预筛选胎牛血清FBP-S005,该款血清内毒素水平≤1 EU/mL。

参考链接:NR8383 [AgC11x3A, NR8383.1] - CRL-2192 |ATCC

中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库/中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心 (cellbank.org.cn)

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