铁是最重要的元素之一,作为酶辅因子发挥着重要作用。血液中的铁与转铁蛋白结合,并被运输到全身以合成球蛋白,如肌红蛋白和血红蛋白。铁对于氧运输蛋白的合成至关重要。铁的缺乏会导致缺铁性贫血、慢性失血性贫血和感染性贫血。
艾美捷JaICA铁检测试剂盒(Nitroso-PSAP):#CFE-010是一种无需对样本进行脱蛋白处理的直接比色法测定试剂盒。通过弱酸性缓冲液从转铁蛋白-铁复合物中解离铁,并通过还原剂将其还原(Fe3+→Fe2+)。亚铁离子与硝基-PSAP(作为显色剂)形成蓝色复合物。有色复合物的强度与样本中的铁浓度成正比。有色复合物的强度与样本中所含铁的量成正比。
试剂盒组成(100次检测)
R-1 缓冲液:1x16毫升 即用型
R-2 缓冲液:1x7毫升 即用型
R-3 螯合显色剂:1x0.7毫升 即用型
STD 200微克/分升铁标准液:1x1.5毫升 即用型
所需但未提供材料:
1. 蒸馏水
2. 微量移液器及吸头
3. 透明平底96孔板
4. 具有750纳米功能的微孔板读数器
测定准备:
1. 使用前将所有试剂平衡至室温。
2. 准备工作试剂:将70微升R-2与7微升R-3混合用于1次检测。
(例如)50次检测的准备
R-2:70微升x50次检测=3.5毫升
R-3:7微升x50次检测=350微升
在容器中混合3.5毫升R-2和350微升R-3。
样本准备:
血清/血浆:应通过过滤或离心去除血清和血浆样本中的不溶性物质。不能使用EDTA血浆。
尿液(24小时混合尿液)/生物液体:向样本中加入6M盐酸,调节pH至2.0-3.0(例如,向1毫升裂解液中加入5-10微升6M盐酸)。以6000转/分钟离心15分钟。收集上清液用于测定。
组织:加入5%TCA溶液,涡旋1分钟,在4-8°C下孵育30分钟。以6000转/分钟离心15分钟。收集上清液用于测定。
注意:样本pH应在pH 2到pH 8之间。
干扰因素:
EDTA会抑制铁与显色系统的反应。该检测不受胆红素-F和胆红素-C(高达40毫克/分升)、血红蛋白(高达0.1克/分升)和乳糜(高达500 FTU)存在影响。
储存条件:于2-8°C处保存。切勿冷冻。
有效期:1年。打开小瓶后,试剂盒应在一个月内使用。
测量范围:10-1000微克/分升
文献参考:
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