艾美捷铁检测试剂盒(Nitroso-PSAP)--无需对样本进行脱蛋白处理

铁是最重要的元素之一,作为酶辅因子发挥着重要作用。血液中的铁与转铁蛋白结合,并被运输到全身以合成球蛋白,如肌红蛋白和血红蛋白。铁对于氧运输蛋白的合成至关重要。铁的缺乏会导致缺铁性贫血、慢性失血性贫血和感染性贫血。

艾美捷JaICA铁检测试剂盒(Nitroso-PSAP):#CFE-010是一种无需对样本进行脱蛋白处理的直接比色法测定试剂盒。通过弱酸性缓冲液从转铁蛋白-铁复合物中解离铁,并通过还原剂将其还原(Fe3+→Fe2+)。亚铁离子与硝基-PSAP(作为显色剂)形成蓝色复合物。有色复合物的强度与样本中的铁浓度成正比。有色复合物的强度与样本中所含铁的量成正比。

 

试剂盒组成(100次检测)

R-1 缓冲液:1x16毫升 即用型

R-2 缓冲液:1x7毫升 即用型

R-3 螯合显色剂:1x0.7毫升 即用型

STD 200微克/分升铁标准液:1x1.5毫升 即用型

 

所需但未提供材料:

1. 蒸馏水

2. 微量移液器及吸头

3. 透明平底96孔板

4. 具有750纳米功能的微孔板读数器

 

测定准备:

1. 使用前将所有试剂平衡至室温。

2. 准备工作试剂:将70微升R-2与7微升R-3混合用于1次检测。

(例如)50次检测的准备

R-2:70微升x50次检测=3.5毫升

R-3:7微升x50次检测=350微升

在容器中混合3.5毫升R-2和350微升R-3。

 

样本准备:

血清/血浆:应通过过滤或离心去除血清和血浆样本中的不溶性物质。不能使用EDTA血浆。

尿液(24小时混合尿液)/生物液体:向样本中加入6M盐酸,调节pH至2.0-3.0(例如,向1毫升裂解液中加入5-10微升6M盐酸)。以6000转/分钟离心15分钟。收集上清液用于测定。

组织:加入5%TCA溶液,涡旋1分钟,在4-8°C下孵育30分钟。以6000转/分钟离心15分钟。收集上清液用于测定。

注意:样本pH应在pH 2到pH 8之间。

 

干扰因素:

EDTA会抑制铁与显色系统的反应。该检测不受胆红素-F和胆红素-C(高达40毫克/分升)、血红蛋白(高达0.1克/分升)和乳糜(高达500 FTU)存在影响。

 

储存条件:于2-8°C处保存。切勿冷冻。

有效期:1年。打开小瓶后,试剂盒应在一个月内使用。

测量范围:10-1000微克/分升

 

文献参考:

(1) Yamada M, Tanioka K, Kishi K, Hatanaka U, Ohnishi M. An automated method for measurement of serum iron and unsatur- ated iron binding capacity using nitroso-PSAP. Jpn J Lab Auto,13, p659-63 (1988).

(2) Nakaya. M, Tajima. M, Kosako. H, Nakaya. T, Hashimoto. A, Watari. K, Nishihara. H, Ohba. M, Komiya. S, Tani. N, Nishida. M, Taniguchi. H, Sato. Y, Matsumoto. M, Tsuda. M, Kuroda. M, Inoue. K, Kurose. H: GRK6 deficiency in mice causes

autoimmune disease due to impaired apoptotic cell clearance, Nature Commun, 4, p1532 (2013).

(3) Ikeda. Y, Tajima. S, Izawa-Ishizawa. Y, Kihira. Y, Ishizawa. K, Tomita. S, Tsuchiya. K, Tamaki. T: Estrogen regulates hepcidin expression via GPR30-BMP6-dependent signaling in hepatocytes, PLoS One, 7(7) (2012).

(4) Tsugawa. H, Suzuki. H, Matsuzaki. J, Hirata. K, Hibi. T: FecA1, a bacterial iron transporter, determines the survival of Helicobacter pylori in the stomach, Free Radic Biol Med. 15, 52(6)  p1003-10 (2012).

(5) Hayashi. K, Nakamura. M, Sakamoto. W, Yogo. T, Miki. H, Ozaki. S, Abe. M, Matsumoto. T, Is himura. K:

Superparamagnetic nanoparticle clusters for cancer theranostics combining magnetic resonance imaging and hyperthermia treatment, Theranostics. 23, 3(6), p366--76 (2013).


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