冻存细胞时要缓慢冷冻。因为细胞在不加任何保护剂的情况下直接冻存，细胞内外的水分会很快形成冰晶，并且随冰晶数量增多，会导致细胞脱水及渗透压增高等后果，从而造成细胞的损伤。目前细胞冻存多采用甘油或二甲亚砜作为保护剂，这两种物质在低温冷冻后对细胞均无明显毒性，并且分子量小，溶解度大，易穿透细胞，可使冰点下降，提高细胞膜对水的通透性；加上缓慢冻存可使细胞内的水分渗出细胞外，在胞外形成冰晶，减少细胞内冰 晶的形成，从而减少由于冰晶形成所造成的细胞损伤。标准的冷冻速度开始为-2~-1℃/min, 当温度低于-25℃时可加速，下降率可增至-10~-5℃/min,到-80℃之后可直接投入液氮内。液氮是最理想的冷冻剂，它的沸点是-196℃,在此温度下，既无化学也无物理变化发生，对标本 pH无影响，气化时不留沉淀，细胞在液氮中可长期保存。
为什么冻存细胞时要缓慢冷冻？
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