Neuro-2a(小鼠脑神经瘤细胞)培养教程

细胞名称: Neuro-2a(小鼠脑神经瘤细胞)

细胞别称: NEURO-2A;Neuro2a;Neuro2a;Neuro2A;N-2a;N2a;N2A;Nb2a;NB2a

细胞货号: SNL-134

生长特性: 贴壁

培养条件: EMEM(MEM+NEAA)+10% FBS+1% P/S

培养环境: 37℃;5% CO2;饱和湿度

细胞简介: Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]细胞是由R·J·Klebe和F·H·Ruddle自A/J小鼠大脑组织自生肿瘤建立的具有神经元和变形干细胞形态的小鼠成神经细胞。Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]细胞产生大量微管蛋白,此蛋白在神经细胞中起应答轴浆流动的收缩系统作用,细胞也表达乙酰胆碱酯酶基因。Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]细胞能够分化成各种类型的神经元。Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]细胞可以用于3D细胞培养、高通量筛选、神经科学研究、毒理学研究。Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]细胞已用于研究长春碱沉淀微管蛋白的机制、GTP与分离蛋白结合的动力学、体内微管的周转以及微管蛋白合成和组装。世界动物卫生组织(OIE)将这些细胞用于狂犬病的常规诊断。Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]细胞经检测鼠痘病毒呈阴性。

Neuro-2a细胞培养注意事项

1. 混合形态

Neuro-2a细胞为圆形细胞和带触角的多角形细胞的混合形态,同时存在部分漂浮细胞。

2. 存在漂浮细胞

Neuro-2a细胞贴壁松散,培养过程中存在30%~50%的漂浮细胞。换液及传代前,培养基需要提前预热,避免更多细胞漂浮。

换液和传代要离心收集漂浮细胞并与原来的细胞混合继续培养。不要丢弃漂浮细胞,否则细胞密度会越来越低,最终导致细胞不增殖。

3.细胞贴壁较慢

Neuro-2a细胞刚接种48小时大部分细胞是未展开的、呈圆形贴壁。72小时后细胞逐渐铺展,部分细胞形成触角。

4.生长速度较慢

Neuro-2a细胞生长较慢,1:2传代周期为3-5天。注意控制细胞密度不要过低,接种密度太低细胞增殖速度会减慢或停止增殖,推荐传代比例1:2。(注意T25培养瓶底面积为25cm2,10cm培养皿底面积是55cm2,一个T25传两个10cm皿约等于1:4传代,而非1:2)。

5.难以完全汇合至100%

Neuro-2a细胞容易聚集堆叠生长,视觉上难以长满,实际细胞密度比观察密度要大。生长至下图所示密度可以传代。

▲ Neuro-2a传代密度示例

6.细胞碎片较多

Neuro-2a细胞的触角在消化时易断裂形成碎片,所以培养时存在一些黑点,但不影响细胞生长。黑点较多时可以通过PBS润洗并换液清除。

7.不建议使用DMEM

不建议使用高糖DMEM培养,可能会导致部分细胞形态改变,生长速度变慢

8.对血清要求高

建议使用高品质的、并确认过培养效果的专用培养基及血清,血清品质对该细胞生长影响甚大。

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