生物质谱法是蛋白质组学研究中最常用的方法,作为蛋白质组学研究中的扛把子,它具有高分辨率、高灵敏度、高准确度、鉴定蛋白质翻译后修饰位点等优点。但对于低丰度蛋白的检测,质谱法仍具有局限性。此外,单针蛋白质谱分析需要较长的时间,这就限制了高通量样本的分析。今天介绍一种简单、快速且不依赖于质谱仪的蛋白质组研究方法——靶向蛋白质组定量方法(Proximity Extension Assay, PEA)。
What is PEA?
PEA是一种靶向蛋白质组定量方法,其结合了基于抗体的免疫分析和PCR或二代测序(Next Generation Sequencing, NGS)技术。它的原理并不复杂:首先针对目标蛋白设计抗体,让每种抗体连接互补的寡核苷酸探针;抗体特异性地与目标蛋白结合后,抗体上的探针对进行近距离杂交,形成PCR模板,继而利用引物对样本进行扩增,最后通过qPCR或NGS实现定量。最终,蛋白浓度信号会转换成核酸信号,实现低丰度蛋白的检测。
Olink Proteomics
2016年基于PEA技术的开创性研究,Olink Proteomics公司在瑞典乌普萨拉正式成立,PEA技术的商业化道路正式开启。Olink Proteomics致力于突破蛋白检测在“多重能力/特异性”、“灵敏度”和“检测通量”等方面的综合瓶颈,进而实现超灵敏多重蛋白标志物检测、无偏靶向蛋白质组学和精准蛋白组学,以帮助蛋白标志物的发现、药物研发、转化医学、以及让“多组学整合”真正切实可行。
同时,基于PEA技术,Olink Proteomics开发并充分验证了一系列开创性的Olink Panel。通过在1-6µl体液中精确检测48-3072种生物标志物,更加充分地理解实时生物学。Olink现已覆盖100%主要信号通路,实现生物学意义上的超灵敏无偏靶向蛋白组学(兼容各种样本类型,对传统方法无法胜任的血浆血清等体液样本尤其适用)。
olink蛋白质组学应用
Olink蛋白质组学应用广泛,目前已有大量研究采用了Olink技术,涉及生物标志物发现、疾病分层、临床预后评估、药物安全性及药效评价等等
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