CRISPR/Cas9‑mediated mutagenesis of Clpsk1 in watermelon to confer resistance to Fusarium oxysporum f.sp. niveum
the first author:Man Zhang。Plant Cell Reports,09 March 2020
西瓜枯萎病(FON),俗称死秧病,是一种真菌性病害。西瓜枯萎病是影响西瓜生产最严重的病害之一,会导致西瓜减产30%-80%以上。以往的研究发现,PSK对植物免疫力起负调控作用,如过量表达PSK(植物黄肽素)的拟南芥更易感病。此研究利用转基因技术敲除PSK的前体基因Clpsk1,最终获得了6株突变体。对突变体的抗性鉴定显示,Clpsk1的功能缺失提高了西瓜幼苗对FON的抗性。此研究表明转基因技术是西瓜品质改良的一种有效途径。
实验材料:Watermelon line Sumi1
载体:pRGEB32 农杆菌:EHA105
1.验证FON和PSK是否相互作用:
(1)FON体外侵染西瓜根部--Clpsk1的表达量逐渐上升
(2)外源PSK可以促进真菌的生长
2.转基因敲除Clpsk1
(1)获得了6株突变体T0,成功率2.3%(6/262);
(2)以WT(感)和Calhoun Gray(抗)为control,T1代都表现出抗性