题目：
The Generation of Human γδT Cell‐Derived Induced Pluripotent Stem Cells from Whole Peripheral Blood Mononuclear Cell Culture
作者：D AISUKE W ATANABE 神户大学
期刊：2017 ,Stem Cells Transl Med
IF:5.9
目的：
为了克服T细胞衰竭的问题，研究人员已经产生了诱导多能干细胞(iPSCs)，它含有与原始T细胞相同的T细胞受体(TCR)基因，这为抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)提供了几乎无限的来源。然而，这些技术主要集中在αβT细胞上，并且需要一个抗原特异性CTL群体，这些CTL群体通过hla -多肽多聚物的细胞分选纯化，作为iPS细胞的起源。
材料与方法
1.我们使用白细胞介素-2和唑来膦酸盐刺激人全外周血单核细胞（PBMC）培养以激活γδT细胞。
全外周血单个核细胞(PBMC)培养中的人γδT细胞根据先前报道的方案被激活，略有修改[9]。首先，使用BD真空吸血管和肝素钠从全血样本中分离出。收集健康志愿者的全血已获得知情同意。随后，PBMC培养在RPMI 1640培养基中用5 mM唑来二酸刺激，并在培养开始时加入10%胎牛血清(Life Technologies)、1.0 3 10 25 M 2Me 、100 U/ml青霉素和100 mg/ml链霉素。将1毫升细胞悬液以1 3 10 6 /ml的密度播种于24孔多培养盘的孔中，并在378C含5% co2的潮湿气氛中培养。从第1天开始，每天添加100 IU/ml人重组IL-2(盐野木制药，大阪，日本)。此后，根据细胞增殖程度，每隔2-3天将培养的细胞按1:2的比例传代到新孔中。在指定时间点用流式细胞仪对培养的细胞进行分析
2.从人γδT细胞培养物中生成iPSC
受激PBMC （1 × 104细胞）悬浮在100μlγδT细胞培养基中，CytoTune-iPS 2.0，含有2种仙台病毒，每种病毒单独编码KLF4和c-MYC，以及1种仙台病毒，其多顺式编码OCT3 / 4，KLF4和SOX2，MOI为10-30并在96孔板中培养。6小时后，将细胞接种在预包有重组层粘连蛋白-511 E8片段的511孔板上。在转导后的第3、5和7天，将另外9 ml hiPSC培养基加到培养物中。从第9天开始，每两天更换一次hiPSC培养基。从第21天开始，我们开始收集和扩大克隆。
结果
1.全PBMC培养中的γδT细胞显性基因转导
γδT 细胞占 T 细胞群的一小部分 （1-5%），据报道被唑来膦酸盐 （Zol） 和白细胞介素 2（IL-2）激活。CD3和TCR Vγ9共染色显示，培养13天后，大部分（但不是全部）培养细胞是具有TCR Vγ9表达的γδT细胞
2.从全PBMC培养物中生成人γδT细胞衍生的iPSC
3.γδT 细胞衍生的 hiPSC 的表征
4.γδT-iPSCs重新分化为造血谱系
结论与评价
这篇文章用到了γδT细胞扩增的一个通用方法，以及简单的γδT细胞的验证工作，可以学习和借鉴，其他内容创新性有，但结果一般。
