AH109酵母菌株

功能:用来进行酵母双杂,研究蛋白之间的互作。或者用来进行转录因子的转录激活验证实验。

AH109:本身是色氨酸(Trp)和亮氨酸(Leu)缺陷的菌株,无法在缺少色氨酸和亮氨酸的培养基中生长,也就可以用来进行转化筛选。

转化标签:GAL4-BD-PGBKT7-色氨酸(Trp),如果转化成功,则说明能够表达Trp基因,从而存活(转录激活使用此载体进行)。GAL4-AD-PGADT7-Leu(亮氨酸),如果转化成功,则能够在缺少亮氨酸的条件下生长,因此在进行酵母双杂的时候,要在双缺的板上来筛选阳性克隆。

报告基因:lacZ, HIS3, ADE2, MEL1。如果转化成功且具有转录激活活性,则可以激活报告基因,在缺少His和Trp的培养基上生长,且能够使LacZ基因表达,从而能够和X-Gal进行显示反应,直观表明具有转录激活活性。

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