样本前处理（防止蛋白提前降解）
1. 贴壁细胞样本
弃去培养板 / 瓶中的培养基，用预冷的 PBS 缓冲液沿壁缓慢冲洗细胞 2-3 次，最后一次需彻底吸干残留 PBS（避免稀释后续裂解液）；若培养基含高浓度血清，可先用预冷无血清培养基润洗 1 次。
用无菌细胞刮刀轻刮培养皿底部，使细胞脱落（力度适中，避免刮破培养皿），初步收集细胞至 1.5mL 离心管。
2. 悬浮细胞样本
将细胞悬液转移至离心管，4℃、500g 离心 5min，弃去上清，收集细胞沉淀。
加入预冷 PBS 重悬沉淀，再次 4℃、500g 离心 5min 洗涤，重复 2 次，彻底去除培养基和血清残留，最后轻弹离心管使细胞沉淀松散。
3. 组织样本
新鲜组织需在冰上快速操作，用预冷 PBS 冲洗去除血污、结缔组织和脂肪（这些杂质会影响裂解效率）。
用无菌手术剪将组织剪成 1-3mm³ 的碎块（组织块越小，与裂解液接触面积越大，裂解越充分）；若暂时不处理，需立即投入液氮速冻，转移至 - 80℃冰箱保存（严禁反复冻融）。
二、裂解提取（核心步骤，以艾克生命 X-RIPA 裂解液为例）
1. 贴壁细胞
按6 孔板每孔 200-400μL 裂解液的比例，向培养板中直接加入预冷的 X-RIPA 裂解液，轻轻晃动培养板使裂解液覆盖所有细胞。冰浴孵育20-30min，期间每 10min 轻弹培养板 1 次，促进细胞膜解离；之后用细胞刮刀刮下细胞裂解物，转移至 1.5mL 离心管，4℃、12000g 离心 5min，取上清即为膜蛋白粗提液。
2. 悬浮细胞
按1×10⁶个细胞加 100-200μL 裂解液的比例，向细胞沉淀中加入预冷裂解液，用移液器轻轻吹打重悬细胞。冰浴孵育20-30min，每 10min 涡旋振荡 10s（力度轻柔，避免产生过多气泡）；之后 4℃、12000g 离心 5min，取上清备用。
3. 组织样本
按20mg 组织加 150-250μL 裂解液的比例，将组织碎块和预冷裂解液加入玻璃匀浆器，冰上手动匀浆15-20 次（至组织无明显颗粒）。将匀浆液转移至离心管，冰浴静置 30min，期间每 10min 轻摇 1 次；随后 4℃、12000g 离心10min（脂类多的组织可延长至 15min），取上清得到膜蛋白提取液。
