吴聊大鼠,大家好,我是上海欣软的吴文远,今天,我将继续和大家仪器对动物行为进行介绍。希望在这个过程中,能够学习到更多的知识,交更多志同道合的朋友,也希望大家多多多关照!
基于体积小,生殖周期短,易观察且基因组与人类基因组高度同源等优势,实验小鼠是复制人类疾病和研究基因功能的首选动物模型。在生命科学,尤其是基础医学、制药等研究领域广泛应用。
实验小鼠在培育过程中已分为多个品系, 根据基因纯合程度,可分为近交系、封闭群、杂交群三类。C57BL /6J、BALB /c 小鼠属于近交系,ICR小鼠属于封闭群,这三个品系小鼠在神经精神等各类疾病模型中广泛应用。本文对这三个品系小鼠学习记忆的不同行为进行研究,以期为神经精神疾病动物模型的品系选择提供参考依据。
1 材料和方法
1. 1 实验动物
10 周龄体重 25 ~ 30 g SPF 级雄性 C57BL /6J、 BALB/c、ICR 小鼠各 10 只,动物设施室内温度 23℃ ~25℃, 相对湿度 55%±10%。维持 12 h 光照/12 h 黑暗的昼夜节律。
1. 2 主要仪器
barnes迷宫实验仪器(上海欣软,型号:XR-XB108);Visutrack 动物行为分析系统
1. 3 实验方法
Barnes 迷宫为直径 88 cm 圆盘,为避免灯光反射,设置为哑光材质,圆盘上有等距分布在圆盘边缘的12 个直径 5 cm 圆洞,圆盘下固定逃避盒,规格 为 15 cm×6 cm×6 cm( 长×宽×高) ,起始盒规格为 10 cm× 10 cm。实验图像记录分析软件为 Visutrack。实验时伴有噪音刺激( 噪音录音,80 db) 和强 光刺激( 直射灯,250 lux) 。在 Barnes 迷宫周围放置几何空间标记物,方便小鼠空间定位,检测间人员 位置与物品摆放位置不变。实验分为适应期、学习期和测试期。适应期,在迷宫中心放置实验小鼠, 扣上起始盒 10 s 后,开启噪音,随之撤掉起始盒,人为干预引导小鼠行动路径,进入目标洞后,立即关闭噪音。小鼠在逃避盒适应 3 min 后取出,适应期 为1 d; 学习期,在迷宫中心放置实验小鼠,扣上起始 盒 10 s 后开启噪音,随之撤掉起始盒,开始实验。
每只实验小鼠一次训练 3 min,一天训练 3 次,共 4 d。3 min 内小鼠进入目标洞,程序停止,看作训练成功,小鼠从起始盒到进入目标洞时间为潜伏期 ( latency) ,如若 3 min 内没有进入目标洞,潜伏期为 3 min。无论是否训练成功,均需将实验小鼠放置在 逃避盒里,适应环境 1 min; 测试期,撤除逃避盒,实 验小鼠测试 1 次,时间为 1. 5 min,操作方法同学习 阶段,共测试 1 d,记录目标洞潜伏期和停留时间。
1. 4 统计学方法
实验结果 以平均数±标准误差 形式表示。采用单因 素方差分析进行多组间比较,当多组间有差异时,两两比较采用 Fisher’s LSD post hoc 多重比较方法。 P < 0. 05 认为具有统计学显著性差异。
2 结果
C57BL/6J、BALB/c、ICR 小鼠 Barnes 迷宫 实验数据比较 如图 所示,在学习期,C57BL/6J 组小鼠进洞潜 伏期最短,其次是 ICR 组小鼠,BALB/c 组小鼠最长。
三组小鼠第 1 天与第 3 天进洞潜伏期差异无统计学 意义,第 2 天与第 4 天进洞潜伏期差异具有统计学意 义( P<0. 05) ; 如图 8 所示,在测试期,C57BL/6J 组小 鼠在目标区探索时间多于 ICR 组小鼠,差异无统计学 意义,C57BL/6J 组小鼠在目标区探索时 间多于 BALB/c 组小鼠,差异具有统计学意义( P<0. 01) ,ICR组小鼠在目标区探索时间多于 BALB/c 组小鼠,但差 异具有统计学意义( P<0. 05) 。
3 讨论
1979 年美国学者 Carol A Barnes 发明 Barnes 迷 宫实验,用于检测海马依赖的空间参考记忆[14]。与 水迷宫实验利用啮齿类动物惧怕水的特性不同, Barnes 迷宫利用啮齿类动物爱探索且避光的特性而 设计,对动物应激刺激较小。实验不需要水源,将 动物放在空旷的 Barnes 迷宫中央,通过使用躁声与 强光作为刺激手段,促使动物寻找目标洞。学习期 结果表示,C57BL /6J 小鼠在进洞潜伏期方面优于 ICR 小鼠和 BALB /c 小鼠; 测试期结果表示,C57BL / 6J 小鼠在目标区停留时间方面优于 ICR 小鼠和 BALB /c 小鼠。综合结果,C57BL /6J 小鼠展示出的 空间参考记忆能力优于 ICR 小鼠和 BALB /c 小鼠。