1、变色的原因
培养基的颜色主要来自酚红,酚红在培养基中用作PH值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色(图片如上)。酚红可以模拟固醇类激素的作用(特别是雌激素)。
虽然细胞培养基变色可能会让人感到担忧,但大多数情况下,这种变化并不会对细胞的生长产生显著影响。然而,如果变色严重或持续时间较长,可能会影响细胞的生长速度和稳定性。
2、对细胞生长的影响
开封后的培养基保存在4℃冰箱中,培养基内的二氧化碳会逐渐溢出,pH偏碱性,所以培养基就偏紫色了。部分细胞能够很快适应培养基的这种PH值波动,放入培养箱后可以正常生长。
偏紫色的培养基,可以通入无菌过滤的二氧化碳,调整pH值后继续使用。长时间没用完的碱性培养基不建议继续使用,会造成细胞生长停滞或死亡。
偏黄色的培养基,如果培养基是橘黄色,则是细胞健康生长的颜色,无须担心,继续培养即可。若细胞状态良好,但换液后培养基颜色变黄速度快,则可能是因为细胞密度大或消耗过大,提示需要传代了。若细胞状态差,生长异常,培养基很快变黄,变浑浊,镜下观察有较多小颗粒物,则有可能是细菌污染(如图5)或支原体污染。轻度污染可用抗生素清洗处理或使用支原体清除试剂,重度污染建议消杀后丢弃。
解决之道
1、了解培养基的特性
酚红在培养基中用作PH值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。酚红可以模拟固醇类激素的作用(特别是雌激素)。
在选择细胞培养基时,了解其成分和性质非常重要。这将有助于您更好地理解可能出现的问题,并采取相应的措施。
2、优化培养环境
尽量保持细胞培养环境的稳定和适宜。并在操作过程中注意无菌操作,避免产生污染。
3、及时更换培养基
如果发现培养基变色严重或持续时间较长,建议及时更换新的培养基。这将有助于确保细胞的健康生长。